آنتیژن کربوهیدرات 153 (CA153) نشانگر تومور

استفاده مورد نظر

کیت تشخیص آنتی ژن کربوهیدرات 15-3 (CA153) (ELISA) در آزمایش های کمی برای CA15-3 در سرم انسان استفاده می شود.

خلاصه و اهمیت بالینی

آنتی ژن کربوهیدرات 15-3 (CA15-3) یک قطعه اپیتوپ MUC-1 از سلول سرطان پستان است که یک گلیکوپروتئین است. CA15-3 در انواع سرطان ها مانند سرطان پستان، ریه و تخمدان وجود دارد..CA15- 3 برای تعیین پیشرفت سرطان پستان و متاستاز و درمان آزمایش بالینی و عود در سرطان استفاده می شود.زخم های سرطان پستان متاستاتیک را می توان در نظر گرفتهنگامی که درمان موثر است، حدود 50 درصد از بیماران غلظت CA15-3 به طور قابل توجهی کاهش یافته است.غلظت CA15-3 حساس تر از معیارهای رادیولوژیکی و بالینی در 96٪ عود محلی است.این واکنشگر عمدتا برای نظارت پویا بر بیماران سرطانی برای تعیین پیشرفت بیماری یا اثر درمانی کمکی استفاده می شود، اما غلظت آن با اندازه تومور ارتباط ندارد.رشددر برخی از بیماری های خوش خیم (مانند بیماری خوش خیم سینه، سیروز، هپاتیت و غیره) نیز می توان دید که شاخص در درجه های مختلف افزایش یافته است.بنابراین، CA15-3 نباید به عنوان یک آزمایش غربالگری عمومی موثر برای غربالگری سرطان، تشخیص زودرس و سایر اهداف در جمعیت عمومی در نظر گرفته شود.

اصل

برای اندازه گیری سطح CA15-3 در سرم، چاه های پلاستیکی پوشانده با آنتی بادی های تک کلونی CA15-3 در کیت عرضه می شوند.نمونه بیمار اضافه می شود و، در طول انکوباسیون، CA15-3، اگر وجود داشته باشد، به آنتی بادی فاز جامد متصل می شود، هنگامی که یک آنتی بادی با برچسب HRP اضافه می شود، ایجاد یک HRP-انتی بادی CA15-3پس از اضافه کردن زیربنای TMB، نتیجه توسط خواننده صفحه EIA بدست می آید.

ماده های واکنش دهنده ارائه شده

مایکروپلاکت پوشش داده شده: 1 صفحه (8 × 12 چاه) ، آماده استفاده است. با آنتی بادی ضد CA15-3 پوشانده شده و در یک کیسه آلومینیومی بسته شده است. نوارهای موجود در کیسه قابل بسته بندی را با یک خشک کننده برای محافظت از رطوبت پس از باز کردن خارج کنید.تا تاریخ انقضا در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگه دارید.

HRP کنژوگیت:1 فنجان 11 میلی لیتر، آماده استفاده. حاوی HRP با برچسب ضد CA15-3 و نگهدارنده proclin-300. در 2 ~ 8 °C نگه دارید تا تاریخ انقضا.

رقیق کردن نمونه: 1 فنجان 11 میلی لیتر، آماده استفاده.

کالیبراسیون:5 فنجان 0.5 میلی لیتر آماده استفاده با برچسب S0 تا S4 و غلظت CA-15-3 0.15,40,100250 U/ml نگه دارید در 2 ~ 8 °C تا تاریخ انقضا.

کنترل:1 بطری از 0.5 میلی لیتر، آماده استفاده.

کروموجن A:1 فنجان 7 میلی لیتر، آماده استفاده. حاوی H2O2. در 2 ~ 8 °C نگه دارید تا تاریخ انقضا.

کروموجن B:1 فنجان 7 میلی لیتر، آماده استفاده. حاوی TMB. در 2 ~ 8 °C نگه دارید تا تاریخ انقضا.

راه حل متوقف کنید:1 فنجان 7 میلی لیتر، آماده استفاده، حاوی H2SO4 نگه دارید در 2 ~ 8 °C تا تاریخ انقضا.

بافر شستن:1 شیرینی 15 میلی لیتر، 20 برابر متمرکز شده، قبل از آزمایش با آب دیونیزه شده رقیق می شود. حاوی NaCl، فسفات و tween-20 است.

سفت کننده صفحه:دو تا

کیسه پلاستیکی قابل بازپوشیدن:یه مجموعه

راهنمای استفاده:یک کپی

آماده سازی

1اجازه دهید که تمام نمونه ها و واکنش ها به دمای اتاق برسند و قبل از استفاده به طور دقیق با تغییر باریک مخلوط شوند.

2. آماده کردن واش بافر با رقیق کردن Wash Concentrate 20 برابر با آب دیونیزه شده. محلول شستشو رقیق شده در دمای اتاق حداقل یک هفته پایدار است.

روش آزمون:

1.نوارهای میکروتیتراسیون مورد استفاده را علامت گذاری کنید. تمام کالیبراسیون ها و کنترل ها باید دو برابر باشند.

2.100 یوول از کالیبراسیون/کنترل ها را به چاه های مربوطه توزیع کنید.

3.نوارها را با یک مهر و موم صفحه پوشانید. آن را به آرامی با چرخش صفحه میکروتیتر بر روی نیمکت صاف مخلوط کنید. صفحه را در 37 ° C برای 0.5 ساعت تزریق کنید.

4.هر چاه را 3 بار بشویید، هر بار 10 ثانیه (برنامه شستن را ببینید)

5.به هر چاه 100 يو پي اچ پي (HRPConjugat) تزريق کنيد.

6.نوارها را با یک سد کننده بشقاب بپوشانید. آن را با گرداندن بشقاب میکروتیتر روی یک نیمکت صاف به آرامی مخلوط کنید. بشقاب را در 37 درجه سانتیگراد برای 0.5 ساعت مهار کنید.

7هر یک را 3 بار بشویید، هر بار 10 ثانیه (رویه شستشوی را ببینید).

8.دهر چاه 50 اونيل کروموجن آتو

9.به هر چاه 50 يوول کروموجن بي بده

10.نوارها را با یک سد کننده نوار تازه بپوشانید. آن را با چرخش نوار میکروتیتر روی یک نیمکت صاف به آرامی مخلوط کنید. نوار را در 37 درجه سانتیگراد برای 15 دقیقه تزریق کنید.

11.50 اونيل محلول توقف را به هر چاه برساند و به طور کامل مخلوط شود

12. جذب صفحه را در عرض 10 دقیقه بخوانید (رویه خواندن را ببینید)

احتیاط برای مصرف کنندگان

1- استفاده از هر نوع پیپتیشن از طریق دهان ممنوع است.

2مواد از دسته های مختلف را مخلوط نکنید. از اجزای کیت بعد از تاریخ انقضا استفاده نکنید.

3.همه مواد باید قبل از استفاده به دمای اتاق منتقل شوند.