کیت تشخیص HPV Human Papillomavirus Multiplex دستورالعمل های PCR در زمان واقعی

کیت تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی ((پی سی آر چندگانه در زمان واقعی)

استفاده مورد نظر

این کیت برای تشخیص کیفی اسیدهای نوکلئیک 18 نوع HPV با خطر بالا در آزمایشگاه (۱۶،18,26,31,33,39,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73،82) در سلول های پوست پاک شده دهانه رحم و ژنوتایپ برای 16 و 18 نوع HPV. یک جفت اولیه اضافی و یک سُند هدف ژن β-گلوبین انسانی را برای کنترل فرآیند فراهم می کند.

خلاصه

• ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) ، متعلق به خانواده پاپیلوماویریدها، یک ویروس کوچک، دایره ای، بدون پوشش، DNA دو رشته ای با طول ژنوم حدود 8000 جفت پایه (bp) است.عفونت HPV در زنان بسیار شایع استحدود 80 درصد از زنان در طول زندگی خود به HPV آلوده شده اند و 90 درصد از آنها می توانند به طور طبیعی در عرض یک تا دو سال پاک شوند.HPV ها به عنوان خطر کم طبقه بندی می شوند، مرتبط با زگیل های خوش خیم یا ضایعات اپیتلیال، یا با خطر بالا، که می تواند منجر به سرطان های سرطانی اوروفارینژ و آنوجنتیال، از جمله سرطان های دهانه رحم، ولوا و مقعد شود.انواع HPV با خطر بالا (hrHPV) مسئول ~ 5٪ از کل سرطان های انسانی هستند و در 99 مورد تشخیص داده می شوند..7 درصد از موارد سرطان دهانه رحم، چهارمین سرطان شایع در زنان، که 7.5 درصد از کل مرگ و میر ناشی از سرطان در زنان در سراسر جهان در سال را تشکیل می دهد.

پارامترهای فنی:

اصل

برای تشخیص کیفی ۱۸ نوع DNA اسید نوکلئیک ویروس پاپیلومای انسانی با خطر بالا (HPV16,18,26,31,33,39,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73،82) در سلول های استخراج دهانه رحم و تایپ HPV16 و 18 است.

سیستم واکنش تقویت PCR این کیت همچنین حاوی Uracil-N-Glycosylase است و می تواند به طور انتخابی پیوند uracil glycosiside را در قطعه PCR حاوی dUTP شکند.کاهش موثر مثبت کاذب ناشی از آلودگی محصول PCR.

روش آزمایش

1آماده سازی واکنشگر

1)PصوتیCکنترل(خشک شده از طریق یخ)از کیت برداریدش به منطقه پردازش نمونه

2) (n+2) را حذف کنیدنوار واکنش دهنده HPV (خشک شده از طریق یخ)، کیسه بسته بندی را پاره کنید و نوارهای 8 لوله ای را که با شماره های 1 تا 8 برچسب زده شده اند، در راستای اعداد، بر روی قفسه PCR قرار دهید و پلاگین سیلیکون را بردارید.

يادداشت:

• n اندازه نمونه است
• هر آزمایش PCR باید شامل یک PC (کنترل مثبت) و یک NTC (کنترل منفی) باشد.

3) 20μL آب بدون نوکلئوز را به لوله 1 تا 8 ازنوار واکنش دهنده HPV (خشک شده از طریق یخ)و بستهTکلاه UBEبرای انتقال واکنشگر به منطقه پردازش نمونه، نوارها را با S1، S2، Sn، NTC، PC علامت گذاری کنید.

2آماده سازی نمونهو آماده سازی کنترل مثبت

1) اگر محلول استخراج نمونه GPDX ((NO. 600220) استفاده شده باشد، 1mL از نمونه را آسپیرایز کنید، در 12000 rpm برای 2 دقیقه سانتریفیوژ کنید، سوپرناتنت را دور بریزید و 100uL آزاد کننده اسید نوکلئیک اضافه کنید.حمام فلزی 95 درجه سانتیگراد برای 10 دقیقه، سانتریفیوژ در 12000rpm برای 2 دقیقه، و supernatant به DNA.

2) اگر محلول استخراج نمونه GPDX ((NO. 600220) در دسترس نبود، استفاده از کیت استخراج اسید نوکلئیک GPDX (No. 600210) توصیه می شود، به دستورالعمل مراجعه کنید.

3) 200 لیتر آب بدون نوکلئاز را بهکنترل مثبت (خشک شده از طریق یخ) ,و بعدش دو دقیقه گرد و غبار شد.انحلالمثبتCکنترلباید قبل از استفاده، گرد و غبار شود و به خوبی مخلوط شود.

یادداشت:

درP محلول شدهصوتیCکنترلباید در دمای -20±5 نگهداری شود.°C.

3. نمونه اضافه کنs

1) نوارهای (n+2) Reagent HPV را (n برای نمونه ها، NTC و PC) بردارید و با سرعت 3000 دور در دقیقه برای 1 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا تمام واکنش را در پایین متمرکز کنید. نوارها را با S1، S2...... Sn، NTC، PC علامت گذاری کنید.سپس قبل از استفاده به آرامی کلاه ها را باز کنید..

5 μl DNA نمونه 1 را به لوله 1 اضافه کنید و لوله های PCR را بپوشانید. نوار نمونه دیگر، نوار NTC و نوار PC را به همان روش نمونه 1 آماده کنید.

2) سانتریفیوژ با سرعت 3000 دور در دقیقه برای 1 دقیقه تا تمام واکنشگر را در پایین متمرکز کند.

3)جایگزینینوار واکنش دهنده HPVبه سیستم PCR در زمان واقعی و برنامه واکنش را بر اساس جدول 2 تنظیم کنید.

پشتیبانی و خدمات:

محصول واکنش دهنده PCR ما با پشتیبانی فنی و خدمات اختصاصی همراه است تا اطمینان حاصل شود که مشتریان ما قادر به استفاده و بهینه سازی محصول به حداکثر توانایی خود هستند.تیم کارشناسان ما در دسترس است تا به هر گونه سوال فنی پاسخ دهد و هر گونه مشکلاتی را که ممکن است در طول استفاده از محصول ایجاد شود، حل کندعلاوه بر این، ما منابع آموزشی و آموزشی را برای کمک به مشتریان برای بهبود درک آنها از محصول و برنامه های کاربردی آن ارائه می دهیم.هدف ما ارائه یک تجربه جامع و بی نقص برای مشتریان ما است، از خرید اولیه تا پشتیبانی و نگهداری مداوم.

بسته بندی و حمل

بسته بندی محصول:

• محصول PCR Reagent باید در یک بطری استریل و بسته بندی شده بسته بندی شود.
• لیوان با نام محصول، شماره دسته و تاریخ انقضا برچسب گذاری خواهد شد.
• لیوان را در یک کیسه پلاستیکی بسته بندی می کنیم تا از آلودگی در طول حمل و نقل جلوگیری شود.

حمل و نقل

• محصول واکنش دهنده PCR در یک ظروف با دمای کنترل شده برای حفظ ثبات محصول ارسال می شود.
• کانتینر حمل و نقل با نام محصول، شماره دسته و تاریخ انقضا برچسب گذاری خواهد شد.
• محصول از طریق یک سرویس کوری معتبر ارسال می شود تا تحویل به موقع و ایمن تضمین شود.