نام محصول

کیت تشخیص RT-PCR در زمان واقعی HDV (ویروس هپاتیت D)

استفاده مورد نظر

برایدر آزمایشگاه تشخیص کیفی RNA HDVدر سرم یا پلاسما انسانتشخیص، نظارت و کمیت بار ویروسیاز عفونت ویروس هپاتیت دی.

پارامترهای فنی:

اصول آزمون

• RT-PCR در زمان واقعی: هدف یک منطقه حفاظت شده ازژنوم HDV(به عنوان مثال،R0یاHDAgاستفاده از ژنپرایمرهای خاص توالی و سُند های TaqMan(به عنوان مثال، FAM-labelled).

• حساسیت بالا و خاصیت بالا: هیچ واکنش متقابل با HBV، HCV یا سایر ویروس های هپاتیت وجود ندارد.

• کنترل داخلی (IC): شامل برای نظارت بر استخراج RNA و مهار PCR (به عنوان مثال، کنترل RNase P یا RNA مصنوعی).

اجزای کیت

1. مخلوط اصلی RT-PCR: حاویترانسکرپتاز معکوس، پلیمراز Taq گرم، dNTPs و بافر بهینه شده.

2. مخلوط پرایمر/سروب: اولیگونوکلوئوتید های خاص HDV با سُند فلورسنت (به عنوان مثال، FAM برای HDV، HEX/VIC برای IC).

3. کنترل:

   • کنترل مثبت: RNA HDV مصنوعی یا ویروس غیرفعال شده.

   • کنترل منفی: آب بدون نوکلئاز

   • کنترل داخلی(اگر شامل شده باشد).

4. سایر عامل ها: DNase/RNase-free water، لوله های واکنش (اگر فراهم شده باشد).

جریان کار

1. آماده سازی نمونه: استخراج RNA ویروسی (متوافق باQIAamp، MagMAX، یا سیستم های خودکار)

2. تنظیمات PCR: آر ان ای استخراج شده را با مخلوط اصلی و پرایمر/سوند مخلوط کنید.

3. تقویت:

   • ترجمه معکوس: 50 درجه سانتیگراد برای 10-15 دقیقه.

   • فعال سازی PCR95 درجه سانتیگراد برای 2 دقیقه و نیم

   • دوچرخه: سیکل ۴۰/۴۵ در ۹۵ درجه سانتیگراد (۱۰ ثانیه) → ۶۰ درجه سانتیگراد (۳۰/۶۰ ثانیه، مطالعه فلورسنت).

4. تحلیل:

   • مقدار: منحنی استاندارد بار ویروسی (IU/mL یا کپی/mL).

   • کیفیت: مقادیر Ct برای نتایج مثبت/منفی.

ویژگی های عملکرد

• حساسیت:≤10 ≈50 IU/ml(95٪ LOD).

• محدوده خطی:۱۰۲٫۱۰۸ IU/ml(کیت های کمی)

• مشخصات خاص: هیچ واکنش متقابل با HBV، HCV، HIV یا سایر عوامل بیماری زا رایج وجود ندارد.

• دقت: CV < 5% برای تغییرات درون و بین آزمایشات.

•