کيت اليزا فاکتور سرطان موش

فاکتور نکروز تومور موش و آلفا، کاشکتین، TNF، TNFSF2، کیت الایزا TNF-α

کیت الایزا آلفا فاکتور نکروز تومور موش برای TNF آلفا 48 چاهک

مواد ارائه شده با کیت

اصول

این کیت الایزا از ساندویچ الایزا به عنوان روش استفاده می کند. صفحه میکرو الایزا استریپ ارائه شده در این کیت از قبل با آنتی بادی خاصی برای پوشش داده شده استTNF-α . استانداردها یا نمونه ها به چاهک های مناسب صفحه میکرو الایزا استریپ اضافه می شوند و با آنتی بادی خاص ترکیب می شوند. سپس یک آنتی بادی کونژوگه با پراکسیداز ترب (HRP) مخصوص برایTNF-α به هر چاهک صفحه میکرو الایزا استریپ اضافه شده و انکوبه می شود. اجزای آزاد شسته می شوند. محلول سوبسترای TMB به هر چاهک اضافه می شود. فقط چاهک هایی که حاوی  هستندTNF-α و آنتی بادی ترومبومدولین کونژوگه HRP به رنگ آبی ظاهر می شوند و پس از افزودن محلول توقف به رنگ زرد تبدیل می شوند. چگالی نوری (OD) به صورت اسپکتروفتومتریک در طول موج 450 نانومتر اندازه گیری می شود. مقدار OD متناسب با غلظتTNF-α است. شما می توانید غلظتTNF-α را در نمونه ها با مقایسه OD نمونه ها با منحنی استاندارد محاسبه کنید.

یادداشت ها:

• کیت را پس از دریافت در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید. کیت باید قبل از سنجش در دمای اتاق متعادل شود. هر نوار غیر ضروری را از صفحه پوشش داده شده با آنتی بادی TNF-α بردارید، آنها را دوباره در فویل زیپ دار ببندید و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگه دارید.
• رسوبات ممکن است در بافر شستشوی غلیظ ظاهر شوند. لطفاً بافر را حرارت دهید تا تمام رسوبات حل شود، که بر نتایج تأثیری نخواهد داشت.
• باید از پیپت دقیق برای جلوگیری از خطای آزمایش استفاده شود. نمونه ها باید در کمتر از 5 دقیقه به میکروپلیت اضافه شوند. اگر تعداد زیادی نمونه وجود دارد، پیپت چند کاناله توصیه می شود.
• منحنی استاندارد باید در هر سنجش گنجانده شود. چاهک های تکراری توصیه می شود. اگر مقدار OD نمونه بیشتر از اولین چاهک استانداردها باشد، لطفاً نمونه را (n بار) قبل از آزمایش رقیق کنید. هنگام محاسبه غلظت ترومبومدولین اصلی، لطفاً ضریب رقت کل (XnX5) را ضرب کنید.
• به منظور جلوگیری از آلودگی متقابل، آب بندهای میکروپلیت فقط برای یک بار استفاده هستند.
• لطفاً سوبسترا را دور از نور نگه دارید.
• تمام عملیات باید دقیقاً مطابق دستورالعمل های سازنده باشد. نتایج تعیین شده توسط دستگاه خوانشگر میکروپلیت.
• تمام نمونه ها، بافر شستشو و ضایعات باید به عنوان عوامل عفونی تلقی شوند.
• واکنشگرها از دسته های مختلف نباید مخلوط شوند.

غلظت های شناخته شده استاندارد TNF-a و OD خواندن مربوطه آن به ترتیب در مقیاس لگاریتمی (محور x) و مقیاس لگاریتمی (محور y) ترسیم می شود. غلظت TNF-a در نمونه با ترسیم OD نمونه در محور Y تعیین می شود. غلظت اصلی با ضرب ضریب رقت محاسبه می شود.