آزمایش خون HBcAb تست الایزا تست آنزیم مرتبط با آنزیم ایمونوسوربنت

سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم کیت HBcAb Elisa Elisa

کیت HBcAb ELISA
شماره کاتالوگ: BE105A

1.خلاصه

1 هپاتیت B یک بیماری عفونی ناشی ازویروس هپاتیت B(HBV) که یک ویروس DNA پوشش دار و دو رشته ای متعلق به خانواده Hepadnaviridae است و به عنوان عامل اصلی هپاتیت منتقله از خون همراه با ویروس هپاتیت C (HCV) شناخته می شود.HBV در مایعات بدن مانند مایع منی، بزاق، خون و ادرار در افراد مبتلا به عفونت حاد یا مزمن دفع می شود.

2 ویروس هپاتیت B به عنوان یک ویروس منتقله از طریق خون شناخته می شود زیرا از طریق خون یا مایعات آلوده به خون از فردی به فرد دیگر منتقل می شود.

3 انتقال ویروس هپاتیت B از قرار گرفتن در معرض خون یا مایعات بدن عفونی است. هنگامی که HBV به بدن حمله می کند، از طریق القای خود ایمنی باعث آسیب کبدی می شود.

•  
• 2. مواد ارائه شده

1. میکروپلیت 1 بلوک (96 چاه)
2. کنترل منفی 1 میلی لیتر × 1
3. کنترل مثبت 1 میلی لیتر × 1
4. کونژوگه 6 میلی لیتر × 1
5. محلول بستر A 6 میلی لیتر × 1
6. محلول بستر B 6 میلی لیتر × 1
7.20×Wash Buffer 40 ml×1
8. محلول استاپ 6 میلی لیتر × 1
9. جلد بشقاب 3 تکه
10. درج 1 نسخه

3 مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است

1. میکروپیپت ها: 0.02، 0.05، 0.10، 0.15، 0.20 و 1.0 میلی لیتر.

2. نوک پیپت یکبار مصرف.

3. آب مقطر یا دیونیزه.

4. جعبه مرطوب با قابلیت حفظ دمای 37 درجه سانتیگراد

5. کاغذ جاذب یا دستمال کاغذی.

6. بشقاب میکروتیتر یا واشر نواری

7. صفحه خوان میکروتیتر با طول موج 450 نانومتر (یا 450 نانومتر/630 نانومتر)

8. تایمر

روش آزمون

1. کیت ELISA (همه معرفها) و نمونه ها را قبل از استفاده به دمای اتاق بیاورید (تقریباً 30 دقیقه).

2. کنسانتره بافر شستشو را از نظر وجود کریستال های نمک بررسی کنید.اگر کریستال‌هایی در محلول تشکیل شده‌اند، با گرم کردن در دمای 37 درجه سانتی‌گراد تا زمانی که کریستال‌ها حل شوند، آن را دوباره حل کنید.بافر غلیظ شستشو را 1:19 با ddH رقیق کنید₂O. فقط از ظروف تمیز برای رقیق کردن بافر استفاده کنید.

3. برای هر آزمایش، یک جای خالی، دو کنترل مثبت و دو کنترل منفی قرار دهید.50μl کنترل مثبت، کنترل منفی و نمونه را به چاه های مربوطه خود اضافه کنید.50 میکرولیتر HRP-Conjugate را به هر چاهی به جز Blank اضافه کنید و با ضربه ملایم روی صفحه مخلوط کنید.نه نمونه و نه HRP-Conjugate نباید به چاه خالی اضافه شود.

4. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید و صفحه میکروتیتر را در یک جعبه مرطوب قرار دهید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.

5. مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.به مدت 15 ثانیه کناری بگذارید، مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.این کار را 5 بار تکرار کنید و لبه چاه ها را روی کاغذ جاذب به مدت چند ثانیه پس از آخرین شستشو مسدود کنید.

6. 50μl بستر A و B را به ترتیب به هر چاهک از جمله چاه خالی اضافه کنید.به آرامی مخلوط کنید و در برابر نور محافظت کنید و 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

7. یک قطره (50 ul) از محلول توقف را به هر چاه از جمله چاه خالی اضافه کنید تا واکنش رنگ متوقف شود.

8. مقدار OD را در 450 نانومتر/630 نانومتر با صفحه خوان فیلتر دوگانه بخوانید.این گزینه برای خواندن مقدار OD در 450 نانومتر با صفحه خوان تک فیلتر است.(استفاده از مقدار OD چاه خالی برای تصحیح تمام قرائت OD از همه چاه ها)