پلاسما IgM 96 عدد کیت تست الایزا کیت تست آنتی بادی تشخیص HAV

HAV IgM Elisa Kit 96 Test/Kit

شماره کاتالوگ: BE301A

1. اصل

1. این کیت از روش capture ELISA برای تشخیص آنتی HAV IgM استفاده می کند.آنتی بادی ضد IgM (μ زنجیره) موش خالص شده روی فاز جامد چند چاه پوشیده شده است.
2. پس از افزودن نمونه رقیق شده و انکوبه شدن، یک HAV-Ag مزدوج به چاهک های پوشش داده شده اضافه می شود.سپس پراکسیداز ترب با برچسب HAV-Ag اضافه می شود.اگر HAV-IgM در نمونه وجود داشته باشد، مجموعه ای از Anti-μ-chain-HAV-IgM –HAV-Ag-برچسب شده با HRP تشکیل می شود.
3. چاه ها را بشویید تا سایر اجزای سرم نامحدود را حذف کنید، با سوبسترا (TMB) انکوبه کنید تا یک محصول رنگی تشکیل شود، و جذب را در 450 نانومتر اندازه گیری کنید تا وجود یا عدم وجود HAV-IgM در نمونه را نشان دهد.
4. این تست ویژه، حساس، قابل تکرار و آسان برای کار است.

2. مواد ارائه شده

1. صفحه 1 بلوک میکرووله پوشش داده شده ضد زنجیره μ (96 چاه)
2. آنزیم مزدوج (HAVAg-HRP) 1 بطری (6 میلی لیتر)
3. بطری مزدوج HAV-Ag 1 (6 میلی لیتر)
4. سرم کنترل منفی 1 ویال (1 میلی لیتر)
5. سرم کنترل مثبت 1 ویال (1ml)
6. بافر شستشوی 20 X (رقیق شدن قبل از استفاده) 1 بطری (30 میلی لیتر)
7. بستر یک بطری (6 میلی لیتر)
8. بطری سوبسترا B 1 (6 میلی لیتر)
9. محلول توقف (2M H2SO4) 1 بطری (6 میلی لیتر)
10. کیسه پلاستیکی 1 کیسه
11. کاغذ مهر 3 عدد
12. کتابچه راهنمای 1 هر کدام

3. روش تست

1. کیت ELISA برای آنتی بادی IgM به ویروس هپاتیت A (همه معرف ها) و نمونه ها را قبل از استفاده به دمای اتاق بیاورید (تقریباً 30 دقیقه).

2. بافر غلیظ شستشو را 1:19 با ddH2O رقیق کنید.

3. نمونه (1:1000) را با سالین فیزیولوژیک رقیق کنید.

4. برای هر آزمایش، یک جای خالی، دو کنترل مثبت و سه کنترل منفی قرار دهید.100μl سرم کنترل مثبت و منفی را به ترتیب به چاهک های کنترل مثبت و منفی اضافه کنید.

5. 100μl نمونه رقیق شده را به چاه های آزمایشی دیگر اضافه کنید.

6. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

7. مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.به مدت 15 ثانیه کناری بگذارید، مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.این کار را 5 بار تکرار کنید و پس از آخرین شستشو به خوبی خشک کنید.

8. 50 میکرولیتر HAV-Ag مزدوج را در هر چاهک به جز قسمت خالی اضافه کنید.

9. افزودنμl 50 میکرولیتر آنزیم مزدوج در هر چاه به جز قسمت خالی

10. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

11. مرحله 7 را تکرار کنید.

12. 50 میکرولیتر بستر A و B را به ترتیب به هر چاهک اضافه کنید، به آرامی در برابر نور مخلوط کنید و 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

13. 50μl محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید تا واکنش متوقف شود، از جمله چاه خالی.

14. جذب را در 450 نانومتر نسبت به قسمت خالی اندازه گیری کنید، یا جذب را در nm 450/630-690 نانومتر اندازه گیری کنید.