کیت تشخیص آنتی بادی کیت HAV IgG Elisa برای ویروس هپاتیت A

کیت تشخیصی برای آنتی بادی IgG برای ویروس هپاتیت A (ELISA)
شماره کاتالوگ: BE302A

1. اصل

این کیت از روش الایزای غیرمستقیم و فاز جامد برای تشخیص آنتی بادی های IgG در برابر HAV (anti-HAV) در سرم یا پلاسما با روش انکوباسیون دو مرحله ای استفاده می کند.میکرو چاه پلی استایرن با آنتی ژن HAV طبیعی خالص شده از قبل پوشش داده شده است.آنتی بادی مونوکلونال ضد IgG (زنجیره r) موش کونژوگه موش به عنوان ردیاب عمل می کند.TMB بستری برای HRP است.واکنش آنزیمی با سوبسترا TMB باعث تغییر رنگ می شود و شدت جذب در 450 نانومتر نشان دهنده وجود یا عدم وجود آنتی بادی های Anti-HAV IgG در نمونه است.تست خاص، حساس، قابل تکرار و آسان برای کار است.این برای غربالگری خون عفونت HAV است.

2. مواد ارائه شده

1. صفحه میکرووله 1 بلوک با پوشش آنتی ژن (96 چاه)
ویال 2 کنترل منفی 1 (1 میلی لیتر)
3. ویال کنترل مثبت 1 (1 میلی لیتر)
4.20 X Wash Buffer (رقیق شدن قبل از استفاده) 1 بطری (30 میلی لیتر)
5. کنژوگانت آنزیمی (ضد IgG-HRP انسانی) 1 بطری (12 میلی لیتر)
6. بستر یک بطری (6 میلی لیتر)
7. بطری سوبسترای B 1 (6 میلی لیتر)
8. محلول توقف (2M H2SO4) 1 بطری (6 میلی لیتر)
9. کیسه پلاستیکی 1 کیسه
10.کاغذ مهر 3 عدد
11. کتابچه راهنمای 1 هر کدام

3. روش تست

1. کیت ELISA برای آنتی بادی IgG برای ویروس هپاتیت A (همه معرف ها) و نمونه ها را قبل از استفاده به دمای اتاق بیاورید (تقریباً 30 دقیقه).

2. برای هر آزمایش، یک کنترل خالی، دو کنترل مثبت و سه کنترل منفی تنظیم کنید.100μl سرم کنترل مثبت و منفی را به ترتیب به چاهک های کنترل مثبت و منفی اضافه کنید.

3. 50 میکرولیتر سرم را در چاهک های آزمایشی یکدیگر اضافه کنید، به بالا و پایین پیپت کنید تا نمونه ها به خوبی مخلوط شوند.

4. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

5. مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.به مدت 15 ثانیه کناری بگذارید، مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.این کار را 5 بار تکرار کنید و پس از آخرین شستشو به خوبی خشک کنید.

6. 100 میکرولیتر آنزیم کنژوگانت را در هر چاهک به جز قسمت خالی اضافه کنید.

7. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

8. مرحله 6 را تکرار کنید.

9. 50μl بستر A و B را به ترتیب به هر چاهک از جمله چاه خالی اضافه کنید.به آرامی مخلوط کنید و در برابر نور محافظت کنید و 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

10. 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید تا واکنش متوقف شود، از جمله چاه خالی.

11. جذب را در 450 نانومتر نسبت به قسمت خالی اندازه گیری کنید، یا جذب را در nm 450/630-690 نانومتر اندازه بگیرید.