سرم کیت تست HEV IgM Elisa در مقابل پلاسما برای تشخیص آنتی بادی

کیت تشخیصی برای آنتی بادی IgM به ویروس هپاتیت E (ELISA)
شماره کاتالوگ:BE402A

1. اصل

این کیت از فاز جامد، روش ELISA ضبط برای تشخیص آنتی بادی های IgM در برابر HEV (ضد HEV) در سرم یا پلاسما با روش انکوباسیون دو مرحله ای استفاده می کند.میکرو چاه پلی استایرن با آنتی بادی مونوکلونال ضد IgM انسانی (زنجیره μ) موش فعال شده از قبل پوشش داده شده است.آنتی ژن HEV نوترکیب کونژوگه HRP به عنوان ردیاب عمل می کند.TMB بستری برای HRP است.واکنش آنزیمی با سوبسترا TMB باعث تغییر رنگ می شود و شدت جذب در 450 نانومتر نشان دهنده وجود یا عدم وجود آنتی بادی های Anti-HEV IgM در نمونه است.تست خاص، حساس، قابل تکرار و آسان برای کار است.برای تشخیص زودهنگام عفونت و بررسی اپیدمی است.

2. مواد ارائه شده

1. بلوک صفحه 1 میکرو چاهی پوشش داده شده با آنتی ژن (96 چاه)
2. رقیق کننده های نمونه 1 بطری (12 میلی لیتر)
3. آنزیم کونژوگانت (ضد انسان IgM -HRP) 1 بطری (12 میلی لیتر)
4. ویال کنترل منفی 1 (1 میلی لیتر)
5. ویال کنترل مثبت 1 (1 میلی لیتر)
6.20 X Wash Buffer (رقیق شدن قبل از استفاده) 1 بطری (30ml)
7. بستر یک بطری (6 میلی لیتر)
8. بطری سوبسترا B 1 (6 میلی لیتر)
9. محلول توقف (2M H2SO4) 1 بطری (6 میلی لیتر)
10. کیسه پلاستیکی 1 کیسه
11. کاغذ مهر 3 عدد
12. کتابچه راهنمای 1 هر کدام

3 روش آزمون

1. کیت ELISA برای آنتی بادی IgG به ویروس هپاتیت E (همه معرف ها) و نمونه ها را قبل از استفاده به دمای اتاق بیاورید (تقریباً 30 دقیقه).

2. بافر غلیظ شستشو را 1:19 با ddH2O رقیق کنید.

3. برای هر آزمایش، یک کنترل خالی، دو کنترل مثبت و سه کنترل منفی تنظیم کنید.100μl سرم کنترل مثبت و منفی را به ترتیب به چاهک های کنترل مثبت و منفی اضافه کنید.

4. 100 میکرولیتر رقیق‌کننده‌های نمونه را در چاهک آزمایشی دیگر، سپس در 10 میکرولیتر نمونه آزمایشی به چاهک‌های آزمایشی اضافه کنید.پیپت کنید تا نمونه ها به خوبی مخلوط شوند.

5. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید و سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

6. مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.به مدت 15 ثانیه کناری بگذارید، مایع را در همه چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.این کار را 5 بار تکرار کنید و پس از آخرین شستشو به خوبی خشک کنید.

7. 100 میکرولیتر آنزیم کنژوگانت را در هر چاهک به جز قسمت خالی اضافه کنید.

8. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید و سپس 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.

9. مرحله 6 را تکرار کنید.

10. 50μl بستر A و B را به ترتیب به هر چاهک از جمله چاه خالی اضافه کنید.به آرامی مخلوط کنید و از نور محافظت کنید و 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

11. 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید تا واکنش متوقف شود، از جمله چاه خالی.

12. جذب را در 450 نانومتر نسبت به قسمت خالی اندازه گیری کنید، یا جذب را در 450 نانومتر/630-690 نانومتر اندازه بگیرید.