تست TSH الایزا تیروتروپین تست هورمون محرک تیروئید

فروش داغ کیت تست TSH ELISA
Ref: DS177701 96 تست

استفاده در نظر گرفته شده
ایمونواسی برای تعیین کمی در شرایط آزمایشگاهی تیروتروپین در سرم انسانی

1. خلاصه

• هورمون محرک تیروئید (TSH، تیروتروپین) یک گلیکوپروتئین است که وزن مولکولی آن تقریباً می باشد.30000 دالتون و متشکل از دو زیر واحد.
• اندازه گیری غلظت سرمی اغلب تیروتروپین (TSH)، گلیکوپروتئینی با وزن مولکولی 28000 دالتون و ترشح شده از هیپوفیز قدامی، عموماً به عنوان حساس ترین شاخص موجود برای تشخیص کم کاری تیروئید اولیه و ثانویه (هیپوفیز) در نظر گرفته می شود. 2).
• اندازه گیری TSH به همان اندازه در افتراق کم کاری تیروئید ثانویه و سوم (هیپوتالاموس) از بیماری اولیه تیروئید مفید است.ترشح TSH از هیپوفیز توسط فاکتور آزاد کننده تیروتروپین (TRH) که توسط هیپوتالاموس ترشح می شود، و با اثر مستقیم T4 و تری یدوتیرونین (T3)، هورمون های تیروئید، در هیپوفیز تنظیم می شود.
• افزایش سطح T3 و T4 پاسخ هیپوفیز به اثرات تحریکی TRH را کاهش می دهد.در کم کاری تیروئید ثانویه و ثانویه، غلظت T4 معمولا کم و سطح TSH به طور کلی کم یا طبیعی است.یا کمبود TSH هیپوفیز (کم کاری تیروئید ثانویه) یا نارسایی تحریک هیپوفیز توسط TRH (کم کاری تیروئید سوم) باعث این امر می شود.
• تست تحریک TRH این شرایط را متمایز می کند.در کم کاری تیروئید ثانویه، پاسخ TSH به TRH کمرنگ می شود در حالی که پاسخ طبیعی یا تاخیری در کم کاری تیروئید ثالثیه به دست می آید. علاوه بر این، ظهور سنجش های ایمونوآنزیم سنجی آزمایشگاه را با حساسیت کافی برای افتراق پرکاری تیروئید از جمعیت یوتیروئید و افزایش سودمندی فراهم کرده است. اندازه گیری TSHاین روش یک سنجش نسل دوم است که ابزاری را برای تمایز در محدوده پرکاری تیروئید- یوتیروئید فراهم می کند.(3)

2. مواد معرف ارائه شده است
• میکروپلیت پوشش داده شده، نوارهای 8×12، 96 چاه، از پیش پوشش داده شده با مونوکلونال Anti-TSH.
• کالیبراتورها، 6 ویال، هر کدام 1 میلی لیتر، آماده استفاده.غلظت: 0 (A)، 0.5 (B)، 2 (C)، 5 (D)، 10 (E) و 25 (F) μIU/mL.
• کنژوگه آنزیم، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر HRP (پراکسیداز ترب کوهی) با برچسب مونوکلونال Anti-TSH موش در بافر Tris-NaCl حاوی BSA (آلبومین سرم گاوی).حاوی 0.1% نگهدارنده ProClin300.
• سوبسترا، 1 ویال، 11 میلی لیتر، آماده مصرف، (tetramethylbenzidine) TMB.
• محلول توقف، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر اسید سولفوریک 1 mol/l.
• محلول شستشو کنسانتره، 1 ویال، 25 میلی لیتر (40X غلیظ)، محلول شستشو PBS-Tween.
• IFU، 1 کپی.
• درب بشقاب: 1 عدد.

مواد مورد نیاز (اما ارائه نشده)
• میکروپلیت ریدر با قابلیت جذب طول موج 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• واشر میکروپلیت.
• ماشین جوجه کشی.
• بشقاب شیکر.
• میکروپیپت ها و میکروپیپت های چند کاناله که 50 میکرولیتر را با دقت بهتر از 1.5 درصد تحویل می دهند.
• کاغذ جاذب.
• آب مقطر

3. روش تست

اطمینان حاصل کنید که نمونه‌ها، کالیبراتورها و کنترل‌های بیماران قبل از اندازه‌گیری در دمای محیط (18-25 ℃) قرار دارند.قبل از استفاده، تمام معرف ها را با وارونگی ملایم مخلوط کنید.

• فقط از تعداد چاه های مورد نیاز استفاده کنید و چاه های میکروپلیت ها را برای هر کالیبراتور و نمونه مورد سنجش فرمت کنید.• 25 میکرولیتر کالیبراتور یا نمونه را به هر چاهک اضافه کنید.

• 100 میکرولیتر کونژوگه آنزیمی را به هر چاهک اضافه کنید.

• میکروپلیت را به مدت 30 ثانیه به آرامی تکان دهید تا مخلوط شود.

• روی صفحه را با درب بشقاب بپوشانید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه انکوبه کنید.

• محتویات میکرو پلیت را با تخلیه یا آسپیراسیون دور بریزید.در صورت تخلیه، ضربه بزنید و صفحه را با کاغذ جاذب خشک کنید.

• 350 میکرولیتر محلول شستشو اضافه کنید، آن را تخلیه کنید (با ضربه زدن و لکه) یا آسپیره کنید.4 بار دیگر برای مجموع 5 شستشو تکرار کنید.می توان از یک شستشوی نواری میکروپلیت خودکار استفاده کرد.در پایان شستشو، صفحه را برعکس کنید و محلول شستشوی باقیمانده را روی کاغذ جاذب بمالید.

• 100 میکرولیتر از بستر را به هر چاهک اضافه کنید.

• بپوشانید و در دمای محیط (25-18 درجه سانتیگراد) در تاریکی به مدت 20 دقیقه انکوبه کنید.پس از افزودن بستر، صفحه را تکان ندهید.

• به هر چاهک 50 میکرولیتر محلول توقف اضافه کنید.

• به مدت 15-20 ثانیه تکان دهید تا مایع درون چاهک مخلوط شود.مهم است که اطمینان حاصل شود که رنگ آبی به طور کامل به زرد تغییر می کند.

• جذب هر چاهک را در 450 نانومتر (با استفاده از 620 تا 630 نانومتر به عنوان طول موج مرجع برای به حداقل رساندن عیوب چاه) در صفحه خوان میکرو بخوانید.نتایج باید ظرف 30 دقیقه پس از افزودن محلول توقف خوانده شود