تست ISO تیروکسین T4 Elisa تست رایگان سرم T4 110 دقیقه زمان خواندن

T4 تیروکسین
Ref: DS177703 96 تست

1. استفاده مورد نظر
ایمونواسی برای تعیین کمی در شرایط آزمایشگاهی تیروکسین در سرم انسانی

2. خلاصه
هورمون تیروکسین (T4) محصول اصلی ترشح شده توسط غده تیروئید است و جزء جدایی ناپذیر سیستم تنظیم کننده هیپوتالاموس- هیپوفیز قدامی- تیروئید است.این عملکرد آنابولیک تحت تاثیر متابولیسم است.تیروکسین در یک واکنش جفت شدن از دو مولکول DIT (3،5-دیودوتیروزین) در غده تیروئید تشکیل می شود.به صورت متصل به تیروگلوبولین در لومینای فولیکول های تیروئید ذخیره می شود و در صورت نیاز تحت تأثیر TSH ترشح می شود.(1، 2) بخش عمده (> 99٪) از کل تیروکسین (T4) در سرم به شکل متصل به پروتئین وجود دارد.از آنجایی که غلظت پروتئین های انتقال در سرم در معرض اثرات برون زا و درون زا است، وضعیت پروتئین های اتصال نیز باید در ارزیابی غلظت هورمون تیروئید در سرم در نظر گرفته شود.اگر این مورد نادیده گرفته شود، تغییرات در پروتئین های اتصال دهنده (به عنوان مثال به دلیل آماده سازی حاوی استروژن، در دوران بارداری یا در حضور سندرم نفروتیک و غیره) می تواند منجر به ارزیابی اشتباه از وضعیت متابولیک تیروئید شود.(3، 4، 5، 6، 7) تعیین T4 را می توان برای نشانه های زیر استفاده کرد: تشخیص پرکاری تیروئید، تشخیص کم کاری تیروئید اولیه و ثانویه، و نظارت بر درمان سرکوب TSH.(8)
سنجش T4 از یک اصل تست رقابتی با آنتی بادی که به طور خاص علیه T4 هدایت می شود، استفاده می کند.درون زا T4، آزاد شده توسط 8-anilino-1-naphthalene سولفونیک اسید (ANS).

3. مواد معرف ارائه شده است
• میکروپلیت پوشش داده شده، نوارهای 8×12، 96 چاه، از پیش پوشش داده شده با مشتق T4.
• کالیبراتورها، 6 ویال، هر کدام 1 میلی لیتر، آماده استفاده.غلظت: 0 (A)، 2.5 (B)، 5 (C)، 10 (D)، 15 (E) و 30 (F) میکروگرم / دسی لیتر.
• کنژوگه آنزیم، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر HRP (پراکسیداز ترب کوهی) نشاندار شده مونوکلونال T4 موش در بافر Tris-NaCl حاوی BSA (آلبومین سرم گاوی).حاوی 0.2% نگهدارنده ProClin300.ANS 1.5 میلی گرم در میلی لیتر.
• سوبسترا، 1 ویال، 11 میلی لیتر، آماده مصرف، (tetramethylbenzidine) TMB.
• محلول توقف، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر اسید سولفوریک 1 mol/l.
• محلول شستشو کنسانتره، 1 ویال، 25 میلی لیتر (40X غلیظ)، محلول شستشو PBS-Tween.
• IFU، 1 کپی.
• درب بشقاب: 1 عدد.

4. مواد مورد نیاز (اما ارائه نشده)
• میکروپلیت ریدر با قابلیت جذب طول موج 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• واشر میکروپلیت.
• ماشین جوجه کشی.
• بشقاب شیکر.
• میکروپیپت ها و میکروپیپت های چند کاناله که 50 میکرولیتر را با دقت بهتر از 1.5 درصد تحویل می دهند.
• کاغذ جاذب.
• آب مقطر

روش تست

اطمینان حاصل کنید که نمونه‌ها، کالیبراتورها و کنترل‌های بیماران قبل از اندازه‌گیری در دمای محیط (18-25 ℃) قرار دارند.قبل از استفاده، تمام معرف ها را با وارونگی ملایم مخلوط کنید.

• فقط از تعداد چاه های مورد نیاز استفاده کنید و چاه های میکروپلیت ها را برای هر کالیبراتور و نمونه مورد سنجش فرمت کنید.• 50 میکرولیتر کالیبراتور یا نمونه را به هر چاهک اضافه کنید.

• 50 میکرولیتر کونژوگه آنزیمی را به هر چاهک اضافه کنید.

• میکروپلیت را به مدت 30 ثانیه به آرامی تکان دهید تا مخلوط شود.

• روی صفحه را با درب بشقاب بپوشانید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه انکوبه کنید.

• محتویات میکرو پلیت را با تخلیه یا آسپیراسیون دور بریزید.در صورت تخلیه، ضربه بزنید و صفحه را با کاغذ جاذب خشک کنید.

• 350 میکرولیتر محلول شستشو اضافه کنید، آن را تخلیه کنید (با ضربه زدن و لکه) یا آسپیره کنید.4 بار دیگر برای مجموع 5 شستشو تکرار کنید.می توان از یک شستشوی نواری میکروپلیت خودکار استفاده کرد.در پایان شستشو، صفحه را برعکس کنید و محلول شستشوی باقیمانده را روی کاغذ جاذب بمالید.

• 100 میکرولیتر از بستر را به هر چاهک اضافه کنید.

• بپوشانید و در دمای محیط (25-18 درجه سانتیگراد) در تاریکی به مدت 20 دقیقه انکوبه کنید.پس از افزودن بستر، صفحه را تکان ندهید.• به هر چاهک 50 میکرولیتر محلول توقف اضافه کنید.

• به مدت 15-20 ثانیه تکان دهید تا مایع درون چاهک مخلوط شود.مهم است که اطمینان حاصل شود که رنگ آبی به طور کامل به زرد تغییر می کند.

• جذب هر چاهک را در 450 نانومتر (با استفاده از 620 تا 630 نانومتر به عنوان طول موج مرجع برای به حداقل رساندن عیوب چاه) در صفحه خوان میکرو بخوانید.نتایج باید ظرف 30 دقیقه پس از افزودن محلول توقف خوانده شود