کیت تست FT3 Elisa 110 دقیقه آزمایش خون رایگان تری یدوتیرونین T3

FT3
کیت تست الایزا FT3

تست رایگان تری یدوتیرونین 96

1. استفاده مورد نظر
ایمونواسی برای تعیین کمی در شرایط آزمایشگاهی تری یدوتیرونین آزاد در سرم انسانی

2. خلاصه

• تری یدوتیرونین یکی از هورمون های تیروئید موجود در سرم است که متابولیسم را تنظیم می کند.تعیین غلظت این هورمون برای تمایز تشخیصی حالات یوتیروئید، پرکاری تیروئید و کم کاری تیروئید مهم است.بخش عمده تری یدوتیرونین کل به پروتئین های حمل و نقل (TBG، پرآلبومین، آلبومین) متصل می شود.
• تری یدوتیرونین آزاد (fT3) شکل فعال فیزیولوژیکی هورمون تیروئید تری یدوتیرونین (T3) است.
• تعیین T3 آزاد این مزیت را دارد که مستقل از تغییرات در غلظت و خواص اتصال پروتئین های اتصال است.بنابراین تعیین اضافی یک پارامتر اتصال (T-جذب، TBG) غیر ضروری است.در عملکرد طبیعی تیروئید، با تغییر غلظت پروتئین های حامل، سطح کل T3 تغییر می کند به طوری که غلظت FT3 ثابت می ماند.
• بنابراین، اندازه گیری غلظت FT3 به ​​طور قابل اعتمادتری با وضعیت بالینی نسبت به سطح T3 کل ارتباط دارد.
• یا به عنوان مثال، افزایش سطح کل T3 مرتبط با بارداری، داروهای ضد بارداری خوراکی و استروژن درمانی منجر به افزایش سطح T3 کل می شود در حالی که غلظت FT3 اساساً بدون تغییر باقی می ماند.علاوه بر این، مشخص شده است که میانگین مقدار FT3 دارای شیب کاهشی از جوان به مسن است.
• معرف ها

3. مواد ارائه شده
• میکروپلیت پوشش داده شده، نوارهای 8×12، 96 چاه، از پیش پوشش داده شده با مشتق T3.
• کالیبراتورها، 6 ویال، هر کدام 1 میلی لیتر، آماده استفاده.غلظت ها: 0 (A)، 2 (B)، 5 (C)، 10 (D)، 20 (E) و 50 (F) pmol/L.
• کنژوگه آنزیم، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر HRP (پراکسیداز ترب کوهی) نشاندار شده مونوکلونال Anti-T3 گوسفند در بافر Tris-NaCl حاوی BSA (آلبومین سرم گاوی).حاوی 0.2% نگهدارنده ProClin300.
• سوبسترا، 1 ویال، 11 میلی لیتر، آماده مصرف، (tetramethylbenzidine) TMB.
• محلول توقف، 1 ویال، 6.0 میلی لیتر اسید سولفوریک 1 mol/l.
• محلول شستشو کنسانتره، 1 ویال، 25 میلی لیتر (40X غلیظ)، محلول شستشو PBS-Tween.
• IFU، 1 کپی.
• درب بشقاب: 1 عدد.

مواد مورد نیاز (اما ارائه نشده)
• میکروپلیت ریدر با قابلیت جذب طول موج 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• واشر میکروپلیت.
• ماشین جوجه کشی.
• بشقاب شیکر.
• میکروپیپت ها و میکروپیپت های چند کاناله که 50 میکرولیتر را با دقت بهتر از 1.5 درصد تحویل می دهند.
• کاغذ جاذب.
• آب مقطر.

4. تولید آزمایشی

اطمینان حاصل کنید که نمونه‌ها، کالیبراتورها و کنترل‌های بیماران قبل از اندازه‌گیری در دمای محیط (18-25 ℃) قرار دارند.قبل از استفاده، تمام معرف ها را با وارونگی ملایم مخلوط کنید.

• فقط از تعداد چاه های مورد نیاز استفاده کنید و چاه های میکروپلیت ها را برای هر کالیبراتور و نمونه مورد سنجش فرمت کنید.• 50 میکرولیتر کالیبراتور یا نمونه را به هر چاهک اضافه کنید.

• 50 میکرولیتر کونژوگه آنزیمی را به هر چاهک اضافه کنید.

• میکروپلیت را به مدت 30 ثانیه به آرامی تکان دهید تا مخلوط شود.

• روی صفحه را با درب بشقاب بپوشانید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه انکوبه کنید.

• محتویات میکرو پلیت را با تخلیه یا آسپیراسیون دور بریزید.در صورت تخلیه، ضربه بزنید و صفحه را با کاغذ جاذب خشک کنید.

• 350 میکرولیتر محلول شستشو اضافه کنید، آن را تخلیه کنید (با ضربه زدن و لکه) یا آسپیره کنید.4 بار دیگر برای مجموع 5 شستشو تکرار کنید.می توان از یک شستشوی نواری میکروپلیت خودکار استفاده کرد.در پایان شستشو، صفحه را برعکس کنید و محلول شستشوی باقیمانده را روی کاغذ جاذب بمالید.• 100 میکرولیتر از بستر را به هر چاهک اضافه کنید.

• بپوشانید و در دمای محیط (25-18 درجه سانتیگراد) در تاریکی به مدت 20 دقیقه انکوبه کنید.پس از افزودن بستر، صفحه را تکان ندهید.• به هر چاهک 50 میکرولیتر محلول توقف اضافه کنید.

• به مدت 15-20 ثانیه تکان دهید تا مایع درون چاهک مخلوط شود.مهم است که اطمینان حاصل شود که رنگ آبی به طور کامل به زرد تغییر می کند.• جذب هر چاهک را در 450 نانومتر (با استفاده از 620 تا 630 نانومتر به عنوان طول موج مرجع برای به حداقل رساندن عیوب چاه) در یک صفحه خوان میکرو بخوانید. نتایج باید ظرف 30 دقیقه پس از افزودن محلول توقف خوانده شود.