آنتی بادی ها علیه ویروس هپاتیت C Elisa Kit

استفاده مورد نظر

ELISA ضد HCV، یک آزمایش ایمنی گیرنده ی مرتبط با آنزیم (ELISA) برای تشخیص کیفی آنتی بادی ها در برابر ویروس هپاتیت C در خون یا پلاسما انسان است.برای غربالگری اهدا کنندگان خون و تشخیص بیماران مرتبط با عفونت با ویروس هپاتیت C طراحی شده است.

روش

آماده سازی واکنشگر:

اجازه دهید واکنشگرها به دمای اتاق (18-30 °C) برسند. تمرکز آب پاش را برای حضور کریستال های نمک بررسی کنید. اگر کریستال ها شکل گرفته اند، با گرم کردن در 37 °C حل می شوند تا کریستال ها حل شوند.شستشو بافر را 20X، همانطور که در دستورالعمل شستشو نشان داده شده است، رقیق کنید..از آب تقطیر شده یا آيوني شده استفاده شده و فقط ظروف پاک شده براي تقطير بوفر استفاده شده.همه عوامل ديگر آماده استفاده هستند

مرحله 1آماده سازی: نشان دادن سه چاه به عنوان کنترل منفی (به عنوان مثال B1، C1، D1) ، دو چاه به عنوان کنترل مثبت (به عنوان مثال E1، F1) و یک خال خالی (به عنوان مثال A1، بدون نمونه یا HRP-Conjugates باید به خال خالی اضافه شود).اگر نتایج با استفاده از خواننده دو طول موج مشخص شود، نیاز به استفاده از بلانکوئل می تواند حذف شود.

مرحله دومبراي آزمايش مورد نياز است

مرحله سوماضافه کردن مخلوط کننده: اضافه کردن 100μl از نمونه مخلوط کننده به هر چاه به جز خالی. اضافه کردن نمونه: اضافه کردن 10μl از کنترل مثبت، کنترل منفی و نمونه به چاه های مربوطه آنها به جز خالی. توجه:از نوک پائپت جدا شده برای هر یک استفاده کنید

مرحله 4نمونه، NegativeControl، PositiveControl برای جلوگیری از آلودگی متقابل.

مرحله پنجمفشار دادن به بشقاب به دقت. تخمک گذاری: بشقاب را با پوشش بشقاب بپوشانید و برای 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد تخمک گذاری کنید. شستن: در پایان تخمک گذاری، پوشش بشقاب را بردارید و دور بیندازید.پنج بار با آب شسته شده خوب شسته شد.هر بار اجازه بدين که اون 30 تا 60 ثانيه آب بکشه

مرحله 6بعد از آخرين دوره شستشويي، بشقاب رو به پايين برگردون

مرحله هفتمتمام بقايايش ها رو بردار

مرحله 8اضافه کردن HRP-Conjugate: اضافه کردن 100μlHRP-Conjugate به هر چاه به جز خالی. حشره کشی: پوشش صفحه با پوشش صفحه و حشره کشی برای 30 دقیقه در 37 °C. شستن: در پایان حشره کشی،پوشش تخته رو بردار و دور بنداز. هرکدوم رو 5 بار با آب شستشوی رقیق بشویید. هر بار اجازه بدید که آبش به مدت 30 تا 60 ثانیه بخوره