کیت ELISA برای IgM آنتی بادی به ویروس هپاتیت A و E

استفاده مورد نظر

کیت ELISA برای آنتی بادی IgM به ویروس هپاتیت A و E یکدر آزمایشگاهآزمایش ایمنی آنزیم برای تشخیص ویروس هپاتیت A و E -IgM در سرم یا پلاسما انسان.

اجزای اصلی

1.آنتيژن پوشش داده ميکرو خوب صفحه

2. رقیق کننده های نمونه

3. ترکیب HAV/HEV-Ag-HRP

4. سرم کنترل منفی

5. سرم کنترل مثبت

6. 20 X پاک کننده شستشو (قبل از استفاده رقیق شود)

7. سوبسترات A

8سوبسترات B

9. راه حل رو متوقف کن

10کیسه پلاستیکی

11کاغذ مهر

12. دستي

روش ارزیابی

1کیت ELISA برای آنتی بادی IgM به ویروس هپاتیت A و E (همه واکنش ها) را بیاورید و نمونه ها را قبل از استفاده (تقریباً 30 دقیقه) به دمای اتاق بیاورید.

2آب پاشی متمرکز 1:19 را با ddH2O رقیق کنید.

3برای هر آزمایش، یک کنترل خالی، دو کنترل مثبت و سه کنترل منفی تنظیم می شود. 100μl سرم کنترل مثبت و منفی به ترتیب به چاه های کنترل مثبت و منفی اضافه می شود.

4نمونه 100μl رقیق شده را به چاه های آزمایش دیگر اضافه کنید.

5چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد انکوبی کنید.

6مایع را در تمام چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شوینده پر کنید. برای 15 ثانیه کنار بگذارید، مایع را در تمام چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شوینده پر کنید.پنج بار تکرار کنید و پس از آخرین شستشوی چاه ها را خشک کنید..

7. 100 μl Enzyme Conjugate را در هر چاه به جز چاه خالی اضافه کنید

8. چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد انکوبی کنید.

9مرحله هفتم رو تکرار کن

10به هر چاه 50 μl سوبسترات A و B اضافه کنید، مخلوط کنید و به آرامی از نور محافظت کنید و 15 دقیقه در 37 °C انکوبی کنید.

11برای متوقف کردن واکنش، 50μl محلول توقف را به هر چاه اضافه کنید، شامل چاه خالی.

12اندازه گیری جذب در 450 نانومتر در برابر خالی، یا اندازه گیری جذب در 450 نانومتر/630-690 نانومتر.