کیت آزمایش ELISA IgM ضد ACA

نام داروها

نام عمومی: کیت آزمایش ELISA IgM Anti-ACA

استفاده مورد نظر

این کیت یک تشخیص کیفی از آنتی بادی IgM آنتی کاردیولپین در سرم/پلازما انسان است. این کیت برای غربالگری و تشخیص بالینی مناسب است.آنتی بادی ACA گروهی از آنتی بادی های خود علیه انواع فوسفولیپید های دارای بار منفی است، می تواند به عنوان یکی از معیارهای تشخیصی سندرم آنتی فوسفولیپید آنتی بادی (از جمله ترومبوز) ، سقط جنین خود به خود، ترومبوسیتوپنی و ضایعات سیستم عصبی مرکزی (CNS) استفاده شود.ACA IgM می تواند به عنوان شاخص احتمالی سقط جنین خود به خود استفاده شودACA مثبت به طور قابل توجهی با ترومبوز CNS در بیماران مبتلا به لوپوس سیستمک اریتماتوس (SLE) همراه بود.

جزئیات محصول

اصل

این کیت از اصل الیزای غیرمستقیم برای تشخیص ACA IgM استفاده می کند. آنتی ژن ACA تصفیه شده بر روی میکروپلاکت پوشش داده می شود، آنتی بادی ACA IgM در نمونه ابتدا با آنتی بادی ACA ترکیب می شود،سپس با آنتی بادی دوم که با آنزیم برچسب گذاری شده است ترکیب می شود تا مجموعه آنتی بادی- آنتی بادی- آنتی بادی را تشکیل دهد.این کیت برای تشخیص خاص ACA IgM در سرم/پلازما انسان استفاده می شود.

روش آزمایش

1قبل از استفاده باید اجازه داده شود که تمام واکنش ها به دمای اتاق برای 15 دقیقه برسند.

2. پیش از استفاده با آب تقطیر شده با سرعت تخلیه 1:40 آب شوینده را تخلیه کنید.

3. 100μL نمونه رقیق کننده را به چاه مربوطه اضافه کنید، نمونه 5μL را به چاه مربوطه اضافه کنید (در چاه خالی اضافه نکنید). با استفاده از پیپت به خوبی مخلوط کنید.50μL از کنترل مثبت و کنترل منفی را به چاه کنترل مثبت و چاه کنترل منفی اضافه کنیدنمونه باید متناسب با تعداد صفحه میکرو باشد، هر صفحه باید با کنترل منفی 2 چاه، کنترل مثبت 1 چاه و کنترل خالی 1 چاه فراهم شود.برای هر نمونه از نوک پیپیت جدا استفاده کنید.، کنترل منفی و مثبت برای جلوگیری از آلودگی متقابل.

4به آرامی تکان دهید تا برای 30 دقیقه مخلوط شود. در 37 درجه سانتیگراد برای 20 دقیقه با غشای صفحه مهر و موم کردن صفحه مهر و موم کنید.

5. در پایان حشره کشی، پوشش بشقاب را بردارید و دور بیندازید. خارج کنید، برای 20 ثانیه به هر چاه آب شویی اضافه کنید. 5 بار تکرار کنید. پس از چرخه شستشوی نهایی، آب شویی را به صورت یک قطعه از آب شویی اضافه کنید.بشقاب را روی کاغذ یا حوله تمیز بگذارید.و به آن ضربه بزنید تا بقایای موجود را از بین ببرید.

6به ترتیب اضافه کردن 50μL کنژوگیت (در چاه خالی اضافه نکنید).

7در درجه 37 درجه سانتیگراد برای 20 دقیقه با غشای صفحه مهر و موم کردن صفحه، تزریق کنید. مرحله شستن را 5 بار مانند مرحله 5 تکرار کنید.

8. سبسترات A (50μL) و سبسترات B (50μL) را اضافه کنید (در چاه خالی اضافه نکنید). در 37 °C برای 10 دقیقه با غشای صفحه مهر و موم که صفحه را مهر و موم می کند.

9. 50μL Stop Solution را به هر چاه اضافه کنید (به چاه خالی اضافه نکنید). با تکان دادن به آرامی مخلوط کنید، جذب را در عرض 10 دقیقه پس از متوقف شدن واکنش بخوانید.کالیبراسیون خواننده صفحه با چاه خالی و خواندن جذب در 450nm. اگر از یک ابزار فیلتر دوگانه استفاده می شود، طول موج مرجع را در 630nm تنظیم کنید. اگر از طول موج دوگانه برای تشخیص استفاده کنید، هیچ چاه خالی مجاز نیست. مقدار Cut-off را محاسبه کنید و نتایج را ارزیابی کنید.

یادداشت های مهم

• کیت از محیط خنک کننده خارج می شود باید 15 تا 30 دقیقه در دمای اتاق تعادل داشته و سپس استفاده شود، صفحه های ELISA اگر بعد از باز شدن استفاده نشده باشد،صفحه باید در کیسه ای مهر و موم شده نگهداری شود..
• پاک کننده شستشوی جداسازی کریستالیزه خواهد شد، آن را می توان گرم آب کمک می کند به حل زمانی که

شستشويي بر نتيجه تاثيري نداره.

• نمونه را با نمونه گیر اضافه کنید هر مرحله، و دقت آن را به طور مکرر بررسی کنید، از خطای تجربی اجتناب کنید. نمونه را در عرض 5 دقیقه اضافه کنید، اگر تعداد نمونه ها زیاد باشد، توصیه می شود از Volley استفاده کنید.
• لطفاً زمانی که تست می کنید، منحنی مشخصات را بسازید، بهتر است به خوبی تکرار کنید،اگر در نمونه محتوای مواد مورد آزمایش بیش از حد بالا باشد (OD نمونه بزرگتر از OD اولین چاه استاندارد است)لطفاً از رقیق کردن نمونه برای رقیق کردن چند برابر مشخص (n بار) استفاده کنید، سپس آزمایش کنید. لطفاً زمان رقیق شدن کل را هنگام محاسبه ضرب کنید ((×n×5).
• غشای صفحه بسته فقط استفاده یکبار مصرف را محدود می کند تا از آلودگی همپوشانی جلوگیری شود.
• بستر لطفا از حفاظت از نور فرار کنید.
• لطفاً طبق دستورالعمل استفاده دقیق، برای تعیین نتایج آزمایش باید از خواننده صفحه ی میکروتیتر به عنوان استاندارد استفاده کنید.
• تمام نمونه ها، آب پاش و هر نوع مواد دفع شده باید مطابق با فرآیند مواد عفونی باشد.
• این واکنشگر که جزء مختلف شماره دسته را مخلوط نمی کند.
• اگر این روش آموزش انگلیسی متفاوت باشد، آموزش انگلیسی را به عنوان استاندارد انتخاب کنید.

ذخیره سازی و ثبات

• در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.

• واکنشگرهای استفاده نشده را به 2- 8 درجه سانتیگراد مهر بزنید و برگردانید، در این شرایط ثبات برای 2 ماه یا تا تاریخ انقضا برچسب شده حفظ می شود، هر کدام زودتر باشد.