کیت آزمایش GAD-Ab ELISA

نام داروها

نام عمومی: کیت آزمایش GAD-Ab ELISA

استفاده مورد نظر

کیت تشخیصی برای آنتی بادی گلوتامک اسید دکاربکسیلاز ((GAD-Ab))کیت ELISA)GAD-Ab EIA در آزمایشات کیفی برای آنتی بادی گلوتامک اسید دکاربکسایلاز ((GAD-Ab) در سرم انسان استفاده می شود.

خلاصه و اهمیت بالینی

گلوتامات دیکاربوکسیلاز (GAD) یک آنزیم محدود کننده سرعت است که گلوتامات را به یک انتقال دهنده عصبی گاما آمینو باترک اسید (GABA) تبدیل می کند، GAD در سلول های β جزیره وجود دارد،و همچنین توسط GABA ترکیب و ترشح می شودآنتی بادی گلوتامات دکاربوکسیلاز (GADA) یک نشانگر ایمنی برای مرحله اولیه دیابت نوع 1 است و همچنین به عنوان یک شاخص درمانی برای درمان دیابت نوع 1 استفاده می شود..شیوع GADA در بیماران مبتلا به دیابت نوع 1 با بیماری گریوز به طور قابل توجهی بالاتر از بیماران مبتلا به دیابت نوع 1 بدون بیماری گریوز بود.سطح GAD در بیماران مبتلا به گریوز به طور قابل توجهی بالاتر بود.، و بروز GADA در بیماران غیر دیابتی همیشه دیابت نوع 1 را پیش بینی نمی کند.

جزئیات محصول

اصل

کیت EIA GAD-Ab باعث پیشرفت گلوتامک اسید انسانی می شود گلوتامک اسید دیکاربوکسیلاز روی صفحه واکنش پوشش داده شده است، برای گرفتن GAD-Ab در نمونه استفاده می شود، مواد خارجی را شسته،سپس اضافه کردن پروکسیداز هارد (HRP) با برچسب آنتی بادی IgG موش ضد انساندر نهایت، شکل گیری فاز جامد با برچسب ضد انسان

مجموعه IgG، به علاوه سیستم رنگی TMB پس از نقش رنگ، نمونه می تواند در آنتی بادی انسولین سرم انسانی در حضور تعیین تشخیص داده شود.

روش آزمایش

• نوارهای میکروتیتراسیون مورد استفاده را علامت گذاری کنید. یک چاه خالی برای پس زمینه، دو چاه برای کنترل منفی، دو چاه برای کنترل مثبت و چاه های دیگر برای نمونه ها را تنظیم کنید.
• نمونه های سرم را 1:11 رقیق کنید و 10 یونیت سرم را به 100 یونیت رقیق کننده نمونه تقسیم کنید.
• تخصیص100ulاز کنترل منفی و همچنین کنترل مثبت یا نمونه ها به چاه های مربوطه.
• نوارها را با یک بسته کننده بشقاب بپوشانید. آن را با گرداندن بشقاب میکروتیتر روی یک نیمکت صاف به آرامی مخلوط کنید. بشقاب را در 37 درجه سانتیگراد برای مدت۶۰ دقیقه.
• هرکدوم رو خوب بشویید تا5هر بار 20 ثانیه (برنامه شستشو را ببینید).
• تخصیص100ul(یا دو قطره) از HRP Conjugate به هر چاه (به استثنای چاه خالی) (برنامه قطره بینی را ببینید).
• نوارها را با یک بسته کننده بشقاب بپوشانید. آن را با گرداندن بشقاب میکروتیتر روی یک نیمکت صاف به آرامی مخلوط کنید. بشقاب را در 37 درجه سانتیگراد برای مدت30 دقیقه.
• هرکدوم رو خوب بشویید تا510 ثانیه در هر بار (برنامه شستشو را ببینید).
• تخصیص50ul(یا یک قطره) کروموجن A به هر چاه (از جمله چاه خالی).
• تخصیص50ul(یا یک قطره) کروموجن B به هر چاه (از جمله چاه خالی).
• نوارها را با یک بسته کننده نوار تازه بپوشانید. آن را با گرداندن نوار میکروتیتر در یک نیمکت صاف به آرامی مخلوط کنید. نوار را در 37 °C برای مدت15 دقیقه.
• تخصیص50ul(یا یک قطره) از محلول توقف به هر چاه (از جمله چاه خالی) و به طور کامل مخلوط.
• میزان جذب صفحه را در عرض 10 دقیقه بخوانید (برنامه خواندن را ببینید)

یادداشت های مهم

• کیت از محیط خنک کننده خارج می شود باید 15 تا 30 دقیقه در دمای اتاق تعادل داشته و سپس استفاده شود، صفحه های ELISA اگر بعد از باز شدن استفاده نشده باشد،صفحه باید در کیسه ای مهر و موم شده نگهداری شود..
• پاک کننده شستشوی جداسازی کریستالیزه خواهد شد، آن را می توان گرم آب کمک می کند به حل زمانی که

شستشويي بر نتيجه تاثيري نداره.

• نمونه را با نمونه گیر اضافه کنید هر مرحله، و دقت آن را به طور مکرر بررسی کنید، از خطای تجربی اجتناب کنید. نمونه را در عرض 5 دقیقه اضافه کنید، اگر تعداد نمونه ها زیاد باشد، توصیه می شود از Volley استفاده کنید.
• لطفاً زمانی که تست می کنید، منحنی مشخصات را بسازید، بهتر است به خوبی تکرار کنید،اگر در نمونه محتوای مواد مورد آزمایش بیش از حد بالا باشد (OD نمونه بزرگتر از OD اولین چاه استاندارد است)لطفاً از رقیق کردن نمونه برای رقیق کردن چند برابر مشخص (n بار) استفاده کنید، سپس آزمایش کنید. لطفاً زمان رقیق شدن کل را هنگام محاسبه ضرب کنید ((×n×5).
• غشای صفحه بسته فقط استفاده یکبار مصرف را محدود می کند تا از آلودگی همپوشانی جلوگیری شود.
• بستر لطفا از حفاظت از نور فرار کنید.
• لطفاً طبق دستورالعمل استفاده دقیق، برای تعیین نتایج آزمایش باید از خواننده صفحه ی میکروتیتر به عنوان استاندارد استفاده کنید.
• تمام نمونه ها، آب پاش و هر نوع مواد دفع شده باید مطابق با فرآیند مواد عفونی باشد.
• این واکنشگر که جزء مختلف شماره دسته را مخلوط نمی کند.
• اگر این روش آموزش انگلیسی متفاوت باشد، آموزش انگلیسی را به عنوان استاندارد انتخاب کنید.

ذخیره سازی و ثبات

• در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.

• واکنشگرهای استفاده نشده را به 2- 8 درجه سانتیگراد مهر بزنید و برگردانید، در این شرایط ثبات برای 2 ماه یا تا تاریخ انقضا برچسب شده حفظ می شود، هر کدام زودتر باشد.