آزمایش HAV IgM Elisa
استفاده مورد نظر
کیت ELISA برای IgM آنتی بادی به هپاتیت A ویروس یک آنزیم در آزمایشگاه است
آزمایش ایمنی برای تشخیص HAV-IgM در سرم یا پلاسما انسان
اصل
این کیت از روش ELISA برای تشخیص IgM ضد HAV استفاده می کند.
آنتی بادی IgM (μchain) موش ضد انسان روی فاز جامد پوشش داده شده است.
یک HAV-Ag متصل به چاه های پوشانده شده پس از
نمونه رقیق شده اضافه شده و تزریق شده است. سپس پروکسیداز هویج
اگر HAV-IgM در نمونه وجود داشته باشد،
مجموعه ای از آنتی-μ-سلسله-HAV-IgM HAV-Ag با برچسب HRP تشکیل می شود.
چاه ها را بشویید تا سایر اجزای سرم را از بین ببرید.
با سبست (TMB) برای تشکیل یک محصول رنگی، و اندازه گیری
جذب در 450nm برای نشان دادن وجود یا عدم وجود HAV-IgM
این آزمایش خاص، حساس، قابل تکرار و آسان است.
عمل کنيد
| جزئیات محصول |
توضیحات |
| تحویل |
در عرض 48 ساعت |
| مشخصات بسته بندی |
8 × 12 نوار، 96 چاه |
| کشور منشاء |
چین |
| تولید کننده |
18 ماه |
| روش نگهداری |
2°C تا 8°C |
| نمونه |
خون کامل |
| آشامیدن |
کلاس1 |
| نوع |
کیت آزمایش HAV IgM Elisa |
جمع آوری و نگهداری نمونه
نمونه های سرم خون به طور معمول از صورت وریدی آماده می شوند.
نمونه ها به طور معمول با مقدار معمول ضد انعقادی آماده می شوند.
نمونه می تواند در ۴ درجه سانتیگراد در صورت آزمایش نگهداری شود.
نمونه را می توان در دمای -20 درجه سانتیگراد حداقل 3 ماه نگهداری کرد.
از خونریزی و یخ زدن و ذوب مجدد نمونه ها اجتناب کنید.
با ابری یا بارندگی باید قبل از آزمایش سانتریفیوژ یا فیلتر شود.
از آلودگی باکتری در سرم در طول جمع آوری و
ذخیره سازی
روش آزمایش
1.کیت ELISA برای آنتی بادی IgM به ویروس هپاتیت A (همه واکنش ها) را بیاورید.
و نمونه ها را قبل از استفاده به دمای اتاق (تقریبا 30°C)
(دقيقه)
2. آبجو فشرده شستشو 1:19 را با ddH رقیق کنید
3نمونه (1:1000) را با محلول فزیولوژیک رقیق کنید.
4برای هر آزمایش، یک کنترل خالی، دو کنترل مثبت و سه کنترل منفی قرار دهید.
100μl از سرم کنترل مثبت و منفی را به مثبت و منفی اضافه کنید.
به ترتیب چاه های کنترل منفی.
5نمونه 100μl رقیق شده را به چاه های آزمایش دیگر اضافه کنید.
6چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد انکوبی کنید.
7مایع را در تمام چاه ها دور بریزید و چاه ها را با محلول شستشو پر کنید.
برای 15 ثانیه کنار بگذارید، مایع را در تمام چاه ها رها کنید و چاه ها را پر کنید.
با محلول شستشو تکرار کنید 5 بار و پس از آخرین شستشو خوب خشک کنید.
850 μl HAV-Ag مخلوط در هر چاه به جز خالی اضافه شود.
9.50μl آنزیم کنژوگانت در هر چاه به جز خال اضافه کنید
10چاه ها را با کاغذ مهر و موم بپوشانید، سپس 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد انکوبی کنید.
11مرحله هفتم رو تکرار کن
12به هر چاه 50 μl بستر A و B را اضافه کنید،به آرامی مخلوط کنید.
از نور محافظت شده و 15 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد مهار شود.
13برای متوقف کردن واکنش، 50μl محلول توقف را به هر چاه اضافه کنید.
از جمله چاه خالي
14. اندازه گیری جذب در 450 nm در برابر خالی، یا اندازه گیری
جذب در 450 nm/630-690 nm.
