کیت آزمایش ELISA ویتامین D 25-OH

استفاده مورد نظر

کیت تشخیص ویتامین D 25-OH (بررسی انزایمی مرتبط با ایمونوسوربنتی ، ELISA). این کیت در آزمایش های کمی برای ویتامین D در سرم انسان استفاده می شود.

خلاصه و اهمیت بالینی

 ویتامین D یک پیشگام هورمون محلول در چربی است که عمدتاً از طریق قرار گرفتن پوست در معرض نور خورشید تولید می شود. ویتامین D بیولوژیکی بی اثر است و برای فعال شدن باید از مرحله هیدروکسیلیشن عبور کند.بدن ما فقط میتونه ویتامین D3 رو ترکیب کنهویتامین D2 می تواند از طریق غذاهای غنی شده یا مکمل ها مصرف شود.ویتامین های D3 و D2 به پروتئین اتصال دهنده ویتامین D (VDBP) در پلاسما متصل می شوند و به کبد منتقل می شوند تا به 25- هیدروکسی ویتامین D (25-OH ویتامین D) تبدیل شونداز آنجا که ویتامین D 25-OH شکل اصلی ذخیره سازی است، غلظت خون آن را می توان برای ارزیابی وضعیت کلی ویتامین D استفاده کرد. بیش از 95٪ از ویتامین D 25-OH قابل اندازه گیری در سرم ویتامین D 25-OH است.,در حالی که ویتامین D2 25-OH تنها در بیماران مصرف کننده مکمل ویتامین D2 به سطوح قابل اندازه گیری می رسد. ویتامین D برای سلامت استخوان ضروری است. در کودکان، کمبود شدید می تواند منجر به راکیت شود.در افراد مسنعلاوه بر این، غلظت پایین ویتامین D 25-OH با تراکم استخوان پایین همراه است.کمبود ویتامین D نیز با دیابت مرتبط استدو مکمل ویتامین D که در حال حاضر در بازار وجود دارند (ویتامین D2 و ویتامین D3) در کبد به ویتامین D 25-OH تبدیل می شوند.جمع غلظت ویتامین D2 و ویتامین D3 در سرم یا پلاسما به عنوان "کل ویتامین D 25-OH" نامیده می شود.در محیط های بالینی، نظارت دقیق بر کل سطح ویتامین D 25-OH بسیار مهم است. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicآزمایش کل ویتامین D از آنتی بادی های خاص برای گرفتن 25- هیدروکسی ویتامین D3 و D2 استفاده می کند.این آزمایش برای اندازه گیری کمی کل ویتامین D 25-OH در سرم و پلاسما انسان برای کمک به ارزیابی ویتامین طراحی شده است.D به اندازه کافی.

اصل

کیت آزمایش کمی ویتامین D 25-OH بر اساس یک آزمایش ایمونوسوربنتی مرتبط با آنزیم در فاز جامد است.سیستم آزمایش از یک آنتی بادی برای بی حرکت کردن فاز جامد (خونه های میکروتیتر) و یک آنتی بادی مونوکلونال دیگر در محلول ها استفاده می کند.سومین آنتی بادی که آنتی بادی دوم را که با یک آنزیم (پروکسیداز هاردین) ترکیب شده است تشخیص می دهد.استاندارد ها و نمونه آزمایش (سروم) به چاه های میکروتیتر پوشانده با آنتی بادی ویتامین D 25-OH اضافه می شوند.، تخمک گذاری 30 دقیقه با آنتی بادی دوم. پس از شستشوی، آنتی بادی سوم با پروکسیداز هویج (جفت) برچسب گذاری شده اضافه می شود. اگر ویتامین D 25-OH انسانی در نمونه وجود داشته باشد,آن با آنتی بادی روی چاه و آنزیمی که به آن متصل می شود ترکیب می شود و در نتیجه بین فاز جامد و آنتی بادی های مرتبط با آنزیمی، ساندویچ تشکیل می شود.چاه ها با آب شسته می شوند تا آنتی بادی های نامبرده را از بین ببرند. یک محلول TMB اضافه شده و برای 20 دقیقه تزریق می شود، که در نتیجه ایجاد یک رنگ آبی است. توسعه رنگ با اضافه کردن راه حل Stop متوقف می شود.رنگ به رنگ زرد تغییر می کند و به صورت طیف فتو متریک در 450 نانومتر اندازه گیری می شود.غلظت ویتامین D مستقیما متناسب با شدت رنگ نمونه آزمایش است.

آماده سازی

1اجازه دهید که تمام نمونه ها و واکنش ها به دمای اتاق (~ 25°C) برسند و قبل از استفاده به طور دقیق با تغییر باریک مخلوط شوند.

2آماده کردن واش بافر با رقیق کردن Wash Concentrate 20 برابر با آب دیونیزه شده. محلول شستشو رقیق شده در دمای اتاق حداقل یک هفته پایدار است.

احتیاط برای مصرف کنندگان

1- استفاده از هر نوع پیپتیشن از طریق دهان ممنوع است.

2مواد از دسته های مختلف را مخلوط نکنید. از اجزای کیت بعد از تاریخ انقضا استفاده نکنید.

3.همه مواد باید قبل از استفاده به دمای اتاق منتقل شوند.