دقت نتایج کیت های آزمایش واکنش دهنده HBsAg ELISA
استفاده مورد نظر
آزمایش HBsAg یک آزمایش ایمونوسورپنت مرتبط با آنزیم (ELISA) برای آزمایش کیفی است.
تعیین ویروس HBsAg در سرم و پلاسما انسان.
| جزئیات محصول |
توضیحات |
| مواد |
سرم |
| اندازه کیت |
96 آزمایش/کیت |
| زندگی ارزشمند |
18 ماه |
| برند |
بیوانتیشن |
| دمای ذخیره سازی |
2-8°C |
| بسته بندی |
کارتن |
| در انبار |
آره |
| فرمت |
HBsAgآزمایش ELISA |
خلاصه
آنتی ژن سطح هپاتیت B (HBsAg) ، یک پلی پپتید با اندازه های متفاوت، یک جزء از
پوشش بیرونی ذرات ویروس هپاتیت B (HBV)1,2علاوه بر سالم بودن
خون افراد مبتلا به HBV حاوی مقادیر زیادی از
ذرات غیر عفونی که فقط از یک لایه بیرونی حاوی HBsAg تشکیل شده اند.3بعد از
HBsAg اولین نشانگر ایمنی است که در سرم تشخیص داده می شود و معمولاً
هفته ها تا ماه ها قبل از شروع علائم بالینی و ظهور علائم دیگر
نشانگرهای بیوشیمیایی.4در مورد عفونت حاد HBV با بهبود، HBsAg
در سرم تا 6 ماه پس از ظاهر شدن آن قابل تشخیص است.4اگر HBsAg برای مدت بیشتری باقی بماند
بیش از 6 ماه پس از هپاتیت حاد، وجود عفونت هپاتیت مزمن B (CHB) باید
طبقه بندی مرحله عفونت CHB برای شناسایی بیمارانی که
نیاز به درمان و نظارت و همچنین ارزیابی احتمال پاسخ به
درمان و خطر پیشرفت به بیماری کبدی شدیدتر5,6,7
اصل آزمایش
اصل ساندویچ.مدت کل آزمایش:هفتاد دقیقه
HBsAg ELISA از روش آنتی بادی (Sandwich) ELISA استفاده می کند که در آن، میکروول های پلی استیرن
نوارها از قبل با آنتی بادی های تک کلونی خاص HBsAg پوشانده می شوند.
نمونه پلاسما به میکروهول همراه با یک آنتی بادی دوم که به میکروهول متصل شده است اضافه می شود.
پروکسیداز هاردین (HRP-Conjugate) و علیه یک
در طول انکوباسیون، این کمپلکس ایمنی خاص در صورت
وجود HBsAg در نمونه، در فاز جامد ثبت می شود.
پروتئین های سرم نمونه و محلول های غیر متصل شده HRP-conjugate، حاوی Chromogen
تترامتیل بنزیدین (TMB) و پروکسید اوریا به چاه اضافه می شوند.
آنتی بادی-انتی ژن-انتی بادی (HRP) Sandwich Immune Complex، کروموجن های بی رنگ
توسط ترکیب HRP به یک محصول آبی هیدرولیز می شوند. رنگ آبی تبدیل می شود
زرد پس از متوقف کردن واکنش با اسید سولفوریک. مقدار شدت رنگ می تواند
اندازه گیری شده و متناسب با مقدار آنتی ژن در چاه ها گرفته شده و
چاه هایی که حاوی نمونه های منفی HBsAg هستند باقی می مانند.
بدون رنگ
ذخیره سازی و ثبات
• در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.
• منجمد نشوید.
• مخزن را مهر و موم کنید و واکنشگرهای استفاده نشده را به 2-8°C برگردانید، که در این شرایط ثبات آن کاهش می یابد.
۲ ماه نگه داشته شود یا تا تاریخ انقضا که روی برچسب نوشته شده، هر کدام زودتر باشد..
جمع آوری و آماده سازی نمونه
•سرم یا پلاسما انسان برای این آزمایش توصیه می شود.
•نمونه ها را در 18 تا 25 درجه گرم نگه دارید.°Cبرای مدت بیش از 8 ساعت.
2-8°C، و یک ماه در -20°Cفقط يه بار منجمدش کن
•از نمونه های غیر فعال شده با حرارت استفاده نکنید.
•نمونه های پلاسما جمع آوری شده در EDTA، سیترات سدیم یا هپارین می تواند آزمایش شود، اما
نمونه های بسیار لیپمیک، ژاکتریک یا همولیتیک نباید استفاده شوند.به اندازه اي که ميتونن
نتایج نادرست در آزمایش.
•رسوبات و مواد جامد معلق در نمونه ها ممکن است در نتیجه آزمایش دخالت کنند که
باید از طریق سانتریفوگاسیون برداشته شود.
نمونه ها قبل از سانتریفیوژن گرفته شده اند.
•از نمونه های خونریزی، لیپمیک و یا مبهم اجتناب کنید.
محلول شستشو (40X رقیق کردن)
آب دیونیزه شده را به غلظت 40X محلول شستشو اضافه کنید.
25 میلی لیتر از غلظت محلول شستشو را با 975 میلی لیتر آب دیونیزه تا حجم نهایی رقیق کنید.
۱۰۰۰ میلی لیتر. برای ۲ ماه در دمای اتاق پایدار است.
