کیت ELISA کمی FSH پیشرفته برای حساسیت بالا و عملکرد در تشخیص دقیق

FSH (هرمون تحریک کننده فولیکول) همراه با LH (هرمون لوتئینز کننده) به خانواده گونادوتروپین تعلق دارد.FSH و LH رشد و عملکرد غدد جنسی ( تخمدان ها و بیضه ها) را به صورت همبستگی تنظیم و تحریک می کنندمانند LH، TSH و hCG، FSH یک گلیکوپروتئین متشکل از دو زیرواحد (سلسله α و β) است. وزن مولکولی آن حدود 32000 دالتون است. در زنان،گونادوتروپین ها در مدار تنظیم کننده هیپوتالاموس- هیپوفیزی- تخمدان برای کنترل چرخه قاعدگی عمل می کنند. (۱، ۲، ۳) FSH و LH به صورت پالس از سلول های گونادوتروپک هیپوفیز پیشانی آزاد می شوند.سطح هورمون های گردش خون توسط هورمون های استروئیدی از طریق بازخورد منفی به هیپوتالاموس کنترل می شود.در تخمدان ها، FSH، همراه با LH، رشد و بلوغ فولیکول را تحریک می کند و بنابراین همچنین بیوسنتز استروژن ها را در فولیکول ها تحریک می کند. سطح FSH در اواسط چرخه اوج خود را نشان می دهد.اگرچه این نسبت به LH کمتر است.به دلیل تغییرات در عملکرد تخمدان و کاهش ترشح استروژن، غلظت بالای FSH در دوران یائسگی رخ می دهد.تعیین غلظت FSH برای روشن کردن اختلالات در سیستم هیپوتالاموس-پایتوفیزی استفاده می شود.تعیین FSH همراه با LH برای نشانه های زیر استفاده می شود: بیماری های مادرزادی با انحراف کروموزومی، تخمدان های پلی کیستیک (PCO) ، آمنوری (علاوه)و سندرم یائسگیسطح پایین گونادوتروپین در مردان در آزواسپرمی رخ می دهد.

اصل ساندویچ، مدت کل آزمایش: 80 دقیقه

• نمونه، میکروول های پوشش داده شده با آنتی FSH و آنزیم برچسب دار با Anti-FSH ترکیب می شوند.

• در طول انکوباسیون، به FSH در نمونه اجازه داده می شود که همزمان با هر دو آنتی بادی واکنش نشان دهد.در نتیجه مولکول های FSH بین فاز جامد و آنتی بادی های مرتبط با آنزیم قرار می گیرند..

• پس از شستن، یک مجتمع بین فاز جامد، FSH در نمونه و آنتی بادی های مرتبط با آنزیم توسط واکنش های ایمنی ایجاد می شود.

• سپس محلول بستر اضافه شده و توسط این مجتمع کاتالیزه می شود، که منجر به واکنش کروموجنیک می شود. واکنش کروموجنیک حاصل به عنوان جذب اندازه گیری می شود.

• جذب متناسب با مقدار FSH در نمونه است.

• میکروپلاکت پوشانده شده، 8 × 12 نوار، 96 چاه، با Anti- FSH مونوکلونال موش پوشانده شده است.

• کالیبراسیون ها، 6 ورق، هر یک 1 میلی لیتر، آماده استفاده؛ غلظت: 0 ((A) ، 5 ((B) ، 20 ((C) ، 50 ((D) ، 100 ((E) و 200 ((F) mIU/ ml.

• آنزیم کنژوگیت، 1 فنجان، 11 میلی لیتر HRP ((peroxidase horseradish) با برچسب موش مونوکلونال Anti- FSH در بافر Tris- NaCl حاوی BSA (البومین سرم گاو). حاوی 0. 1٪ محافظ ProClin300 است.

• سوبسترات، 1 فنجان، 11 میلی لیتر، آماده برای استفاده، (تترامتیل بنزیدین) TMB.

• Stop Solution، 1 فنجان، 6. 0 میلی لیتر از 1 مول/ لیتر اسید سولفوریک.

• غلظت محلول شستشو، 1 فنجان، 25 میلی لیتر (40X متمرکز) ، محلول شستشو PBS-Tween.

• IFU، 1 نسخه

• پوشش بشقاب: 1 قطعه

• در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.

• چاه های استفاده نشده را در کیسه زپ قفل شده آلومینیومی قرار دهید و به 2- 8 °C برگردانید، در این شرایط چاه ها برای 2 ماه یا تا تاریخ انقضا برچسب گذاری شده پایدار خواهند ماند.هر کدام زودتر باشد.

• کالیبراسیون های استفاده نشده را به 2-8 درجه سانتیگراد مهر بزنید و برگردانید، در این شرایط ثبات برای یک ماه حفظ می شود، برای استفاده طولانی تر، کالیبراسیون های باز شده را در آلیکوات ها نگه دارید و در -20 درجه سانتیگراد منجمد کنید.از چرخه های متعدد یخ و ذوب اجتناب کنید.

• تمام واکنش های دیگر که استفاده نشده اند را مهر و موم کنید و به 2- 8 °C برگردانید، در این شرایط ثبات برای 2 ماه یا تا تاریخ انقضا برچسب شده حفظ می شود، هر کدام زودتر باشد.