کیت آزمایش TB-IGRA ELISA

1اصل

TB-IGRA یکدر آزمایشگاهآزمایش تشخیصی که پاسخ های ایمنی توسط سلول ها را بهMycobacterium TB(MTB) عفونت با اندازه گیری اینترفرون گاما (IFN-γ) که توسط سلول های T حساس شده در هنگام تحریک با آنتی ژن های خاص MTB (به عنوان مثال ESAT-6، CFP-10 و TB7.7) آزاد می شود.

2ویژگی های کلیدی

• مشخصیت بالا:

  • از آنتی ژن های خاص MTB استفاده می کند (که در BCG و بیشتر میکوباکتری های غیر سل وجود ندارد) ، و مثبت های کاذب را به حداقل می رساند.

• حساسیت بالا:

  • هم عفونت سل فعال و هم عفونت سل پنهان (LTBI) را با دقت بالاتر در مقایسه با آزمایش پوست سل (TST) تشخیص می دهد.

• نتایج کمی/کیفی:

  • نتایج با توجه به سیستم عامل متفاوت است (به عنوان مثال، شمارش نقطه ای در آزمایش های ELISPOT یا غلظت IFN-γ در ELISA).

• بازگشت سریع: نتایج به طور معمول در۲۴/۴۸ ساعت.

3الزامات نمونه گیری

• نوع نمونه: خون کامل محیطی تازه (هپارینیزه شده)

• حجم: معمولا1 ¢3 میلی لیتردر هر آزمایش (با توجه به سازنده کیت متفاوت است).

• ذخیره سازی: فرآیند در داخل۸- ۳۲ ساعت(بسته به مشخصات کیت)

4روش ارزیابی

1. تحریک: خون را با آنتی ژن های MTB و کنترل ها (کنترل منفی/میتوژن) تزریق کنید.

2. شناسایی IFN-γ:

   • بر اساس ELISPOT (به عنوان مثال، T-SPOT.TB): سلولهای T که IFN-γ را ترشح می کنند را به عنوان لکه ها بشمارید.

   • بر اساس ELISA (به عنوان مثال، QuantiFERON-TB Gold): غلظت IFN-γ را از طریق آزمایش ایمنی اندازه گیری کنید.

3. تفسیر:

   • نتایج در مقایسه با مقادیر محدودی (بر اساس آزمایش متفاوت است).

   • نتایج نامشخص ممکن است نیاز به آزمایش مجدد داشته باشد.

5شاخص های عملکرد

• حساسیت: > 90% برای سل فعال، ~ 80% برای LTBI.

• مشخصات خاص: >95% (با واکسیناسیون BCG تحت تاثیر قرار نمی گیرد).

• واکنش متقابل: حداقل با میکوباکتری های غیر سل (NTM).

6نشانه ها

• غربالگری برای LTBI در گروه های پرخطر (به عنوان مثال، بیماران مبتلا به HIV +، بیماران با سیستم ایمنی ضعیف، تماس های نزدیک).

• آزمایش مکمل برای تشخیص سل فعال (باید با علائم بالینی و سایر آزمایشات ارتباط داشته باشد).

7مزایا نسبت به TST

• هیچ واکنش متقابل با BCG وجود ندارد.

• آزمایش یکبار (بدون بازگشت برای خواندن).

• نتایج عینی و آزمایشگاهی.

8محدودیت ها

• نمیتونه از سل فعال و LTBI متمایز بشه

• به تجهیزات آزمایشگاهی تخصصی نیاز داره

• از TST گران تر است

• احتمال منفی کاذب در بیمارانی که سیستم ایمنی بدنشان ضعیف است

9کیت های سازگار (نمونه ها)

• T-SPOT.TB(اوکسفورد ايمونوتک): بر اساس ELISPOT.

• QuantiFERON-TB Gold Plusبر اساس آزمايش ELISA

10وضعیت نظارتی

• توسط FDA / CE / WHO برای غربالگری عفونت سل تأیید شده است.

تشخیص در آزمایشگاه

فقط برای استفاده

این کیت حاوی واکنش های کافی برای آزمایش حداکثر 28 نمونه در یک آزمایش است. اجزای تحریک:

1کنترل منفی (پوش خاکستری)

2آنتی ژن سل، لیوفیلیزه (پوش بنفش)

3داروی رقیق کننده آنتی ژن سل (پوش بنفش)

4کنترل مثبت (پوش قرمز) 28تست 28تست 0.9 میلی لیتر 28تست

اجزای ELISA

1. نوار های میکروپلاکت

2IFN-γ استاندارد انسانی، لیوفیلیزه شده (پوش آبی)

3. رقیق کننده

4آنتی بادی با برچسب بیوتین (کاپ زرد) 12x 8 چاه 2x شیرینی 1x 40 میلی لیتر 1x 6 میلی لیتر

5آنزیم کنژوگیت 100X غلظت (فنجان قهوه ای) 1 x 130μL

6. شستشو بافر 10X غلظت 1 x 40mL

7محلول کروموجن A

8محلول کروموجن B

9توقف محلول 1 x 6mL 1 x 6mL 1 x 6mL

اصل آزمون