کیت تست الایزا CMV IgG

موارد استفاده

تست الایزا CMV IgG برای تشخیص و تعیین کمی آنتی بادی IgG به CMV در سرم انسانی در نظر گرفته شده است.

روش سنجش

• آماده سازی معرف ها: 1 حجم بافر شستشو (20×) را با 19 حجم آب مقطر رقیق کنید، خوب مخلوط کنید.
• افزودن نمونه ها: کیسه فویلی را باز کرده و میکروپلیت را خارج کنید. 1 چاهک را به عنوان بلانک، 2 چاهک را به عنوان کنترل منفی، 2 چاهک را به عنوان کنترل مثبت تنظیم کنید. پس از توزیع 100 میکرولیتر از رقیق کننده نمونه، 10 میکرولیتر از نمونه، 100 میکرولیتر کنترل منفی یا کنترل مثبت را به چاهک های مربوطه (بدون رقیق کننده نمونه) توزیع کنید. به آرامی صفحه را لرزش دهید.
• انکوباسیون: میکروپلیت را با درپوش صفحه بپوشانید و میکروپلیت را در حمام آب با کنترل ترموستات یا انکوباتور میکروپلیت در دمای 37℃ به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
• شستشوی صفحه: درپوش صفحه را بردارید. محتویات تمام چاهک ها را آسپیراسیون کنید. چاهک ها را با بافر شستشوی رقیق شده پر کنید (10 تا 20 ثانیه خیس کنید) سپس دوباره آسپیراسیون کنید. این روش را 5 بار تکرار کنید. اطمینان حاصل کنید که حجم باقی مانده حداقل است، با ضربه زدن به صفحه روی کاغذ جاذب.
• افزودن کونژوگه: 100 میکرولیتر کونژوگه به هر چاهک (به جز چاهک بلانک) اضافه کنید.
• انکوباسیون: میکروپلیت را بپوشانید و صفحه را در دمای 37℃ به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
• شستشوی صفحه: روش شستشو را همانطور که در مرحله 4 انجام شد، تکرار کنید.
• افزودن سوبسترا: 50 میکرولیتر محلول سوبسترای A و 50 میکرولیتر محلول سوبسترای B را به هر چاهک اضافه کنید، خوب مخلوط کنید. درپوش بگذارید و در دمای 37℃ به مدت 15 دقیقه انکوبه کنید.
• توقف واکنش: 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید، خوب مخلوط کنید.
• جذب را در 450 نانومتر بخوانید. اگر از اندازه گیری با طول موج دوگانه استفاده می شود، طول موج مرجع باید از 620 نانومتر تا 690 نانومتر انتخاب شود.

نگهداری

• در دمای 2-8℃ نگهداری شود.

• چاهک های استفاده نشده را در کیسه فویلی آلومینیومی زیپ دار قرار دهید و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد برگردانید، که در این شرایط چاهک ها به مدت 2 ماه یا تا تاریخ انقضای برچسب، هر کدام زودتر باشد، پایدار می مانند.

• کالیبراتورهای استفاده نشده را مهر و موم کرده و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد برگردانید، که در این شرایط پایداری به مدت 1 ماه حفظ می شود، برای استفاده طولانی تر، کالیبراتورهای باز شده را در آلی کوت ها نگهداری کرده و در دمای 20- درجه سانتیگراد منجمد کنید. از چرخه های متعدد انجماد و ذوب خودداری کنید.

• تمام معرف های استفاده نشده دیگر را مهر و موم کرده و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد برگردانید، که در این شرایط پایداری به مدت 2 ماه یا تا تاریخ انقضای برچسب، هر کدام زودتر باشد، حفظ می شود.