فقط برای استفاده تشخیصی و حرفه ای آزمایشگاهی.
نام
کیت تست ELISA Anti-Ct IgG (سرم/پلاسما)
استفاده مورد نظر
این کیت تشخیص کیفی سرم/پلاسمای انسانی کلامیدیا تراکوماتیس (Ct) IgG است. کیت است
مناسب برای غربالگری بالینی و تشخیص عفونت Ct در سرم/پلاسما.
اصل آزمون
آنتی ژن Ct در فاز جامد به میکروپلیت واکنش پلی استایرن جذب می شود. اگر آنتی بادی Ct IgG وجود داشته باشد
در نمونه آزمایشی، به آنتی ژن Ct پوشش داده شده در میکروپلیت متصل می شود، کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی را تشکیل می دهد و سپس
به آنزیم برچسب ضد آنتی بادی متصل می شود و کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی-آنتی بادی را روی سطح تشکیل می دهد.
از میکروپلیت، و رنگ آبی را به خوبی از طریق عمل زیرلایه نشان می دهد. بنابراین، آن
می تواند به طور خاص Ct IgG را در سرم/پلاسمای انسان تشخیص دهد.
روش تست
1. تمام معرف ها را به مدت 15 دقیقه قبل از استفاده در دمای اتاق متعادل کنید.
2. قبل از استفاده بافر شستشو را با سرعت رقت 1:40 با آب مقطر رقیق کنید.
3. 100μL نمونه رقیق کننده را در چاه مربوطه اضافه کنید (در چاه خالی، منفی اضافه نکنید
چاه کنترل و چاه کنترل مثبت.) نمونه باید مطابق با تعداد میکرو باشد
صفحه، هر صفحه باید با کنترل منفی 2 چاه، کنترل مثبت 1 چاه و خالی ارائه شود
کنترل 1 چاه. 5μL نمونه را در چاه مربوطه اضافه کنید، با استفاده از پیپت کاملا مخلوط کنید، اضافه کنید
50μL کنترل منفی و کنترل مثبت به چاه کنترل منفی و چاه کنترل مثبت (نباید
جای خالی را به خوبی اضافه کنید).
توجه: برای هر نمونه از نوک پیپت دفع جداگانه استفاده کنید، کنترل منفی و مثبت
از آلودگی متقابل جلوگیری کنید
4. به آرامی تکان دهید تا به مدت 30 ثانیه مخلوط شود. در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 20 دقیقه با غشای صفحه آب بند قرار دهید
آب بندی صفحه
5. در پایان انکوباسیون، پوشش صفحه را بردارید و دور بیندازید. خارج کنید، بافر شستشو را به آن اضافه کنید
هر چاه به مدت 20 ثانیه 5 بار تکرار کنید. پس از چرخه نهایی شستشو، بشقاب را برگردانید
کاغذ لکه دار یا حوله تمیز، و روی آن ضربه بزنید تا باقیمانده آن پاک شود.
6. به ترتیب افزودن آنزیم کونژوگه 50 میکرولیتر (در قسمت خالی اضافه نکنید)
7. در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 20 دقیقه با غشای صفحه آب بندی که صفحه را آب بندی می کند، انکوبه کنید. را تکرار کنید
مرحله شستشو 5 بار مانند مرحله 5.
8. زیرلایه A 50µL و بستر B 50µL را اضافه کنید (در جای خالی اضافه نکنید). جوجه کشی در 37 ℃ برای
10 دقیقه با غشای صفحه آب بندی که صفحه را آب بندی می کند.
9. 50μL محلول توقف را به هر چاه اضافه کنید (در چاه خالی اضافه نکنید). با تکان دادن به آرامی مخلوط کنید، آن را بخوانید
جذب ظرف 10 دقیقه پس از توقف واکنش. صفحه خوان را با Blank کالیبره کنید
خوب و جذب را در 450 نانومتر بخوانید. اگر از ابزار فیلتر دوگانه استفاده می شود، مرجع را تنظیم کنید
طول موج 630 نانومتر در صورت استفاده از طول موج دوگانه برای تشخیص، هیچ چاه خالی تنظیم نمی شود. را محاسبه کنید
مقدار قطع کنید و نتایج را ارزیابی کنید.
تفسیر نتایج
کرونومتری: چگالی نوری (OD) نمونه را در 450 نانومتر با صفحه خوان میکرو بخوانید.
میانگین مقدار OD کنترل منفی ≤ 0.1 و میانگین مقدار OD کنترل مثبت ≥ 0.8، آزمون معتبر است،
در غیر این صورت آزمون نامعتبر است.
مقدار Cut-Off (CO) = مقدار میانگین OD کنترل منفی x 3 (محاسبه شده با 0.10 زمانی که میانگین
مقدار OD کنترل منفی <0.10 است که با مقدار واقعی زمانی که میانگین OD کنترل منفی محاسبه می شود
مقدار > 0.10 است)
نتایج مثبت: مقدار OD نمونه ≥ CO
پیام شما باید بین 20 تا 3000 کاراکتر باشد!
Persian
