کیت آزمایش ELISA IgG Chlamydia Trachomatis (Ct)
فقط برای استفاده حرفه ای و تشخیصی in vitro.
نام
کیت آزمایش ELISA IgG ضد Ct (سرم/پلازما)
استفاده مورد نظر
این کیت برای تشخیص کیفی خون و پلاسمای انسان از Chlamydia trachomatis (Ct) IgG است.
برای غربالگری بالینی و تشخیص عفونت Ct در سرم/پلازما مناسب است.
اصول آزمون
آنتی بادی Ct در فاز جامد به میکروپلاکت واکنش پلی استیرن جذب می شود.
در نمونه آزمایش، به آنتی ژن Ct پوشش داده شده در میکروپلاکت متصل می شود، مجموعه آنتی ژن-انتی بادی را تشکیل می دهد و سپس
به آنزیم با برچسب آنتی بادی متصل می شود و یک مجموعه آنتی بادی-انتی بادی-انتی بادی را در سطح تشکیل می دهد
از microplate، و نشان رنگ آبی در مربوطه به خوبی از طریق عمل بستر. بنابراین، آن را
می تواند به طور خاص Ct IgG را در سرم/پلاسمای انسان تشخیص دهد.
روش آزمایش
1تمام واکنشگرها را برای 15 دقیقه قبل از استفاده به دمای اتاق تعادل دهید.
2. پیش از استفاده با آب تقطیر شده با سرعت تخلیه 1:40 آب پاک کننده شستشو را تخلیه کنید.
3. اضافه کردن 100μL نمونه رقیق کننده در چاه مربوطه (در چاه خالی اضافه نکنید، منفی
نمونه باید متناسب با تعداد میکرو
صفحه، هر صفحه باید با کنترل منفی 2 چاه، کنترل مثبت 1 چاه و خالی فراهم شود
چاه کنترل 1، نمونه 5μL را به چاه مربوطه اضافه کنید، با استفاده از پیپت به طور کامل مخلوط کنید،
50μL کنترل منفی و کنترل مثبت به چاه های کنترل منفی و چاه کنترل مثبت
به چاه خالي اضافه کنيد).
توجه: برای هر نمونه، کنترل منفی و مثبت، از نوک pipette جدا استفاده کنید تا
از آلودگی متقابل اجتناب کنید.
4. به آرامی تکان دهید تا برای 30 دقیقه مخلوط شود. در 37 درجه سانتیگراد برای 20 دقیقه با غشای صفحه مهر و موم تزریق کنید.
-تخت کردن صفحه.
5در پایان انکوباسیون، پوشش بشقاب را بردارید و دور بیندازید.
هر چاه برای 20 ثانیه تکرار 5 بار پس از چرخه شستشوی نهایی، بشقاب را روی
کاغذ پاک کننده یا حوله تمیز و برای حذف بقایای آن ضربه بزنید.
6به ترتیب اضافه کردن آنزیم کنژوگات 50μL (نمی افزاید در چاه خالی)
7. در 37 درجه سانتیگراد برای 20 دقیقه با غشای صفحه مهر و موم کردن صفحه ی مهر و موم کنید.
مرحله شستشو 5 بار مانند مرحله 5
8. سبسترات A 50μL و سبسترات B 50μL اضافه کنید (در چاه خالی اضافه نکنید).
10 دقيقه با غشاي صفحه مهر و موم کردن صفحه مهر و موم.
9. به هر چاه 50μL Stop Solution اضافه کنید (به چاه خالی اضافه نکنید).
در عرض 10 دقیقه پس از متوقف شدن واکنش، جذب کننده را اندازه گیری کنید.
به خوبی و خواندن جذب در 450nm.اگر یک ابزار فیلتر دوگانه استفاده می شود، تنظیم مرجع
طول موج در 630nm. تنظیم هیچ چاه خالی مجاز است اگر استفاده از طول موج دوگانه برای تشخیص.
مقدار قطع و ارزیابی نتایج.
تفسیر نتایج
زمان سنجی: چگالی نوری نمونه را با یک خواننده صفحه کوچک در 450 نانومتر بخوانید.
میانگین مقدار OD کنترل منفی ≤ 0.1 و میانگین مقدار OD کنترل مثبت ≥ 0.8تست معتبر است.
در غیر این صورت، آزمایش بی اعتبار است.
ارزش قطع (C.O.) = میانگین OD از کنترل منفی x 3 (حساب شده توسط 0.10 زمانی که میانگین
مقدار OD کنترل منفی < 0.10، محاسبه شده بر اساس ارزش واقعی زمانی که کنترل منفی متوسط OD
مقدار > 0.10)
نتایج مثبت: مقدار OD نمونه ≥ CO