کیت تست الایزا CMV IgG

کاربرد

تست الایزا CMV IgG برای تشخیص و تعیین کمی آنتی بادی IgG به CMV در سرم انسان در نظر گرفته شده است.

روش انجام آزمایش

• آماده سازی معرف ها: 1 حجم از بافر شستشو (20 برابر) را با 19 حجم آب مقطر رقیق کرده و خوب مخلوط کنید.
• اضافه کردن نمونه ها: کیسه فویل را باز کرده و صفحه میکرولیتر را خارج کنید. 1 چاهک را به عنوان بلنک، 2 چاهک را به عنوان کنترل منفی و 2 چاهک را به عنوان کنترل مثبت تنظیم کنید. پس از ریختن 100 میکرولیتر از رقیق کننده نمونه، 10 میکرولیتر نمونه، 100 میکرولیتر کنترل منفی یا کنترل مثبت را به چاهک های مربوطه اضافه کنید (بدون رقیق کننده نمونه). صفحه را به آرامی بلرزانید.
• انکوباسیون: صفحه میکرولیتر را با درپوش صفحه بپوشانید و صفحه میکرولیتر را در حمام آب با دمای کنترل شده یا انکوباتور میکرولیتر در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
• شستشوی صفحه: درپوش صفحه را بردارید. محتویات تمام چاهک ها را آسپیراسیون کنید. چاهک ها را با بافر شستشوی رقیق شده پر کنید (10 تا 20 ثانیه خیس بخورد) سپس دوباره آسپیراسیون کنید. این روش را 5 بار تکرار کنید. اطمینان حاصل کنید که حجم باقی مانده حداقل است، با ضربه زدن صفحه روی کاغذ جاذب.
• اضافه کردن کونژوگه: 100 میکرولیتر کونژوگه به هر چاهک (به جز چاهک بلنک) اضافه کنید.
• انکوباسیون: صفحه میکرولیتر را بپوشانید و صفحه را در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
• شستشوی صفحه: روش شستشو را مانند مرحله 4 تکرار کنید.
• اضافه کردن سوبسترا: 50 میکرولیتر محلول سوبسترا A و 50 میکرولیتر محلول سوبسترا B به هر چاهک اضافه کرده و خوب مخلوط کنید. بپوشانید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه انکوبه کنید.
• توقف واکنش: 50 میکرولیتر محلول توقف به هر چاهک اضافه کرده و خوب مخلوط کنید.
• جذب نوری را در طول موج 450 نانومتر بخوانید. در صورت استفاده از اندازه گیری دو طول موج، طول موج مرجع باید از 620 نانومتر تا 690 نانومتر انتخاب شود.

نگهداری

در دمای 2-8 درجه سانتیگراد نگهداری شود.

چاهک های استفاده نشده را در کیسه فویل آلومینیومی زیپ دار قرار داده و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد بازگردانید، در این شرایط چاهک ها به مدت 2 ماه یا تا تاریخ انقضای مشخص شده، هر کدام زودتر باشد، پایدار خواهند ماند.

کالیبراتورهای استفاده نشده را مهر و موم کرده و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد بازگردانید، در این شرایط پایداری به مدت 1 ماه حفظ خواهد شد، برای استفاده طولانی تر، کالیبراتورهای باز شده را در مقادیر کم تقسیم کرده و در دمای -20 درجه سانتیگراد منجمد کنید. از چرخه های انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.

تمام معرف های استفاده نشده دیگر را مهر و موم کرده و به دمای 2-8 درجه سانتیگراد بازگردانید، در این شرایط پایداری به مدت 2 ماه یا تا تاریخ انقضای مشخص شده، هر کدام زودتر باشد، حفظ خواهد شد.