فقط برای تشخیص آزمایشگاهی و استفاده حرفه‌ای.

کیت تست الایزا آنتی-Ct IgG (سرم/پلاسما)

این کیت برای تشخیص کیفی آنتی‌بادی IgG کلامیدیا تراکوماتیس (Ct) در سرم/پلاسمای انسان است. این کیت

برای غربالگری بالینی و تشخیص عفونت Ct در سرم/پلاسما مناسب است.

آنتی‌ژن Ct در فاز جامد بر روی میکروپلیت واکنش پلی‌استایرن جذب می‌شود. اگر آنتی‌بادی IgG Ct

در نمونه آزمایشی وجود داشته باشد، به آنتی‌ژن Ct پوشش داده شده در میکروپلیت متصل شده و کمپلکس آنتی‌ژن-آنتی‌بادی را تشکیل می‌دهد، سپس

به آنتی‌بادی کونژوگه شده با آنزیم متصل شده و کمپلکس آنتی‌ژن-آنتی‌بادی-آنتی‌بادی را بر روی سطح

میکروپلیت تشکیل می‌دهد و از طریق عمل سوبسترا، رنگ آبی را در چاهک مربوطه نشان می‌دهد. بنابراین، می‌تواند به طور خاص آنتی‌بادی IgG Ct را در سرم/پلاسمای انسان تشخیص دهد.

روش آزمایش

2. بافر شستشو را قبل از استفاده با آب مقطر به نسبت 1:40 رقیق کنید.

3. 100 میکرولیتر رقیق‌کننده نمونه را در چاهک مربوطه اضافه کنید (به چاهک بلانک، چاهک‌های کنترل منفی و چاهک کنترل مثبت اضافه نکنید). نمونه باید متناسب با تعداد میکرو

پلیت باشد، هر پلیت باید دارای 2 چاهک کنترل منفی، 1 چاهک کنترل مثبت و 1 چاهک کنترل بلانک باشد. 5 میکرولیتر نمونه را در چاهک مربوطه اضافه کرده، با استفاده از پیپت کاملاً مخلوط کنید،

50 میکرولیتر کنترل منفی و کنترل مثبت را به چاهک‌های کنترل منفی و چاهک کنترل مثبت اضافه کنید (به چاهک بلانک اضافه نکنید).

توجه: برای جلوگیری از آلودگی متقاطع، از یک نوک پیپت جداگانه برای هر نمونه، کنترل منفی و کنترل مثبت استفاده کنید.

4. به آرامی به مدت 30 ثانیه تکان دهید تا مخلوط شود. در دمای 37 درجه سانتی‌گراد به مدت 20 دقیقه با غشای پوشاننده پلیت انکوبه کنید.

5. در پایان انکوباسیون، پوشش پلیت را برداشته و دور بیندازید. بافر شستشو را برداشته و به مدت 20 ثانیه به هر چاهک اضافه کنید. 5 بار تکرار کنید. پس از چرخه شستشوی نهایی، پلیت را بر روی

کاغذ جاذب یا حوله تمیز برگردانید و آن را ضربه بزنید تا باقی‌مانده‌ها خارج شوند.

6. به ترتیب 50 میکرولیتر کونژوگه آنزیمی اضافه کنید (به چاهک بلانک اضافه نکنید).

7. در دمای 37 درجه سانتی‌گراد به مدت 20 دقیقه با غشای پوشاننده پلیت انکوبه کنید. مرحله شستشو را مانند مرحله 5، 5 بار تکرار کنید.

8. 50 میکرولیتر سوبسترا A و 50 میکرولیتر سوبسترا B اضافه کنید (به چاهک بلانک اضافه نکنید). در دمای 37 درجه سانتی‌گراد به مدت

10 دقیقه با غشای پوشاننده پلیت انکوبه کنید.

9. 50 میکرولیتر محلول توقف به هر چاهک اضافه کنید (به چاهک بلانک اضافه نکنید). با تکان دادن به آرامی مخلوط کنید، جذب نوری را ظرف 10 دقیقه پس از توقف واکنش بخوانید. دستگاه خوانش پلیت را با چاهک بلانک کالیبره کرده و جذب نوری را در طول موج 450 نانومتر بخوانید. اگر از دستگاه با فیلتر دوگانه استفاده می‌شود، طول موج مرجع را روی 630 نانومتر تنظیم کنید. در صورت استفاده از طول موج دوگانه برای تشخیص، استفاده از چاهک بلانک مجاز نیست. مقدار حد آستانه را محاسبه کرده و نتایج را ارزیابی کنید.

تفسیر نتایج

زمان‌سنجی: چگالی نوری (OD) نمونه را در طول موج 450 نانومتر با دستگاه خوانش میکروپلیت بخوانید.

اگر میانگین OD کنترل منفی ≤ 0.1 و میانگین OD کنترل مثبت ≥ 0.8 باشد، آزمایش معتبر است، در غیر این صورت آزمایش نامعتبر است.

مقدار حد آستانه (C.O.) = میانگین مقدار OD کنترل منفی × 3 (در صورتی که میانگین مقدار OD کنترل منفی

کمتر از 0.10 باشد، با مقدار 0.10 محاسبه می‌شود، در صورتی که میانگین مقدار OD کنترل منفی

بیشتر از 0.10 باشد، با مقدار واقعی محاسبه می‌شود).

نتایج مثبت: مقدار OD نمونه ≥ C.O.