جزئیات محصول:
|
هدف: | فقط برای استفاده تحقیقاتی | تاریخ انقضا: | 180 روز |
---|---|---|---|
ذخیره سازی: | 2-8 درجه سانتیگراد | مشخصات: | 48 چاه / 96 چاه |
روش: | ساندویچ | Cat. گربه No. خیر: | In-Hu3523 |
برجسته کردن: | کیت الیزا فریتین انسانی FE,تست الیزا فریتین FE,تست الیزا فریتین ولز 96 |
فریتین انسانی، کیت FE ELISA
مواد ارائه شده به همراه کیت
مواد ارائه شده به همراه کیت | 48 تعیین | 96 تعیین | ذخیره سازی | |
1 | راهنمای کاربری | 1 | 1 | RT |
2 | غشای صفحه بسته | 2 | 2 | RT |
3 | کیسه های مهر و موم شده | 1 | 1 | RT |
4 | نوار میکروالیزا | 1 | 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
5 | استاندارد: 36ng/ml | 0.5 میلی لیتر × 1 بطری | 0.5 میلی لیتر × 1 بطری | 2-8 درجه سانتیگراد |
6 | رقیق کننده استاندارد | 1.5 میلی لیتر × 1 بطری | 1.5 میلی لیتر × 1 بطری | 2-8 درجه سانتیگراد |
7 | معرف HRP-Conjugate | بطری 3 میلی لیتر × 1 | بطری 6 میلی لیتر × 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
8 | رقیق کننده نمونه | بطری 3 میلی لیتر × 1 | بطری 6 میلی لیتر × 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
9 | محلول کروموژن A | بطری 3 میلی لیتر × 1 | بطری 6 میلی لیتر × 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
10 | محلول کروموژن B | بطری 3 میلی لیتر × 1 | بطری 6 میلی لیتر × 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
11 | راه حل توقف | بطری 3 میلی لیتر × 1 | بطری 6 میلی لیتر × 1 | 2-8 درجه سانتیگراد |
12 | محلول شستشو | 20 میلی لیتر (20X) × 1 بطری | 20 میلی لیتر (30X)×1 بطری | 2-8 درجه سانتیگراد |
روش
رقیق سازی استانداردها
1. ده چاه برای استانداردها در نوار Microelisa تنظیم شده است.در چاه 1 و چاه 2، 100 میکرولیتر محلول استاندارد و 50 میکرولیتر بافر رقت استاندارد اضافه شده و به خوبی مخلوط می شوند.در چاه 3 و چاه 4، 100 میکرولیتر محلول از چاه 1 و چاه 2 به ترتیب اضافه می شود.سپس 50 میکرولیتر بافر رقت استاندارد اضافه می شود و به خوبی مخلوط می شود.محلول 50 میکرولیتر از چاه 3 و چاه 4 دور ریخته می شود. در چاه 5 و چاه 6، 50 میکرولیتر محلول از چاه 3 و چاه 4 به ترتیب اضافه می شود.سپس 50 میکرولیتر بافر رقت استاندارد اضافه می شود و به خوبی مخلوط می شود.در چاه 7 و چاه 8 به ترتیب 50 میکرولیتر محلول از چاه 5 و چاه 6 اضافه می شود.سپس 50 میکرولیتر بافر رقت استاندارد اضافه می شود و به خوبی مخلوط می شود.در چاه 9 و چاه 10 به ترتیب 50 میکرولیتر محلول از چاه 7 و چاه 8 اضافه می شود.سپس 50 میکرولیتر بافر رقت استاندارد اضافه می شود و به خوبی مخلوط می شود.محلول 50 میکرولیتر از چاه 9 و چاه 10 دور ریخته می شود. پس از رقیق سازی، حجم کل در همه چاهک ها 50 میکرولیتر و غلظت ها به ترتیب 24 نانوگرم در میلی لیتر، 16 نانوگرم در میلی لیتر، 8 نانوگرم در میلی لیتر، 4 نانوگرم بر میلی لیتر و 2 نانوگرم بر میلی لیتر است. .
2. در نوار Microelisa، یک چاه را به عنوان شاهد خالی بگذارید.در چاهک های نمونه، 40 میکرولیتر بافر رقت نمونه و 10 میکرولیتر نمونه اضافه می شود (ضریب رقت 5 است).نمونه ها باید بدون دست زدن به دیواره چاه در پایین بارگذاری شوند.با تکان دادن ملایم خوب مخلوط کنید.
3. جوجه کشی: 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد پس از مهر و موم شدن با غشای صفحه بسته شدن انکوبه کنید.
4. رقیق سازی: بافر غلیظ شستشو را با آب مقطر رقیق کنید (30 بار برای 96T و 20 بار برای 48T).
5. شستشو: غشای صفحه بسته را با دقت جدا کنید، آسپیره کنید و دوباره با محلول شستشو پر کنید.پس از 30 ثانیه استراحت محلول شستشو را دور بریزید.روش شستشو را 5 بار تکرار کنید.
6. 50 میکرولیتر معرف HRP-Conjugate را به هر چاهک به جز چاه شاهد خالی اضافه کنید.
7. جوجه کشی همانطور که در مرحله 3 توضیح داده شد.
8. شستشو همانطور که در مرحله 5 توضیح داده شد.
9. رنگ آمیزی: 50 میکرولیتر محلول کروموژن A و 50 میکرولیتر محلول کروموژن B را به هر چاهک اضافه کنید، با تکان دادن ملایم مخلوط کنید و به مدت 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.لطفا در هنگام رنگ آمیزی از نور اجتناب کنید.
10. خاتمه: 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید تا واکنش خاتمه یابد.رنگ در چاه باید از آبی به زرد تغییر کند.
11. جذب OD را در 450 نانومتر با استفاده از صفحه خوان میکروتیتر بخوانید.مقدار OD چاه کنترلی خالی برابر با صفر تنظیم می شود.آزمایش باید در عرض 15 دقیقه پس از افزودن محلول توقف انجام شود.
دقت، درستی
دقت درون سنجش (دقت درون یک سنجش): 3 نمونه با سطح پایین، متوسط و بالا Human Ferritin (FE) به ترتیب 20 بار روی یک صفحه آزمایش شدند.
دقت بین سنجش (دقت بین سنجش): 3 نمونه با سطح پایین، متوسط و بالا Human Ferritin (FE) بر روی 3 صفحه مختلف، 8 تکرار در هر پلیت مورد آزمایش قرار گرفتند.
CV(%) = SD/MeanX100
درون سنجش: CV<10%
بین سنجش: CV<12%
محدوده سنجش
0.4ng/ml-25ng/ml
تماس با شخص: Mr. Steven
تلفن: +8618600464506