زیرواحد گیرنده اینترلوکین 2 آلفا موس IL2R CD25 IL2-RA کیت الایزا

زیرواحد آلفا گیرنده اینترلوکین 2 موش.IL2R;کیت الایزا CD25;IL2-RA

مواد ارائه شده به همراه کیت

الزامات نمونه

• سرم-انعقاد در دمای اتاق 10-20 دقیقه، سانتریفیوژ 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه مایع رویی را حذف کنید، اگر بارش ظاهر شد، دوباره گریز از مرکز.
• پلاسما-از EDTA یا پلاسمای سیترات مناسب به عنوان ضد انعقاد استفاده کنید، 10-20 دقیقه مخلوط کنید، سانتریفیوژ 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه، مایع رویی را بردارید، اگر بارش ظاهر شد، دوباره سانتریفیوژ کنید.
• ادراریک ظرف استریل جمع آوری کنید، سانتریفیوژ 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه، مایع رویی را بردارید، اگر بارش ظاهر شد، دوباره گریز از مرکز.عملیات هیدروتوراکس و مایع مغزی نخاعی اشاره به آن.
• مایع رویی کشت سلولی-تشخیص اجزای ترشحی، جمع آوری یک ظرف استریل، سانتریفیوژ 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه، مایع رویی را حذف کنید، ترکیب سلول ها را شناسایی کنید، سوسپانسیون سلولی رقیق شده با PBS (PH7.2-7.4)، غلظت سلولی به 1 میلیون رسید. / میلی لیتر، چرخه های مکرر انجماد و ذوب، آسیب به سلول ها و آزادسازی اجزای داخل سلولی، سانتریفیوژ 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه، مایع رویی را حذف می کند، اگر بارش ظاهر شد، دوباره گریز از مرکز.
• نمونه های بافت- پس از برش نمونه ها، وزن را بررسی کنید، PBS (PH7.2-7.4) را اضافه کنید، به سرعت با نیتروژن مایع منجمد شود، نمونه ها را در دمای 2-8 درجه سانتیگراد پس از ذوب نگه دارید، PBS (PH7.4) را اضافه کنید، با دست یا آسیاب همگن شده، سانتریفیوژ کنید. 20 دقیقه با سرعت 2000-3000 دور در دقیقه مایع رویی را خارج کنید.
• در اسرع وقت پس از جمع آوری نمونه و با توجه به متون مربوطه استخراج شود و باید در اسرع وقت پس از استخراج آزمایش شود.اگر نمی تواند، نمونه را می توان در -20 ℃ نگهداری کرد تا حفظ شود، از تکرار چرخه های انجماد و ذوب خودداری کنید.
• نمی توان نمونه حاوی NaN3 را تشخیص داد، زیرا NaN3 HRP فعال را مهار می کند.

اصل

این کیت ELISA از روش Sandwich-ELISA استفاده می کند.نوار Microelisa ارائه شده در این کیت از قبل با یک آنتی بادی خاص پوشش داده شده استIL2R.استانداردها یا نمونه ها به چاه های نواری Microelisa مناسب اضافه می شوند و با آنتی بادی خاص ترکیب می شوند.سپس یک آنتی بادی کونژوگه با پراکسیداز ترب کوهی (HRP) اختصاصی برایIL2Rبه هر حلقه Microelisa striplate اضافه می شود و انکوبه می شود.اجزای رایگان شسته می شوند.محلول بستر TMB به هر چاه اضافه می شود.فقط آن چاه هایی که حاویIL2Rو آنتی بادی ترومبومودولین کونژوگه HRP به رنگ آبی ظاهر می شود و پس از افزودن محلول استاپ زرد می شود.چگالی نوری (OD) به روش اسپکتروفتومتری در طول موج 450 نانومتر اندازه گیری می شود.مقدار OD متناسب با غلظت استIL2R.می توانید غلظت آن را محاسبه کنیدIL2Rدر نمونه ها با مقایسه OD نمونه ها با منحنی استاندارد.

یادداشت:

• کیت را در دمای 4 درجه سانتیگراد پس از دریافت نگهداری کنید. کیت باید قبل از سنجش در دمای اتاق متعادل شود.هر گونه نوار غیر ضروری را از صفحه پوشش داده شده با آنتی بادی IL2R بردارید، آنها را دوباره در فویل قفل زیپ ببندید و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.
• رسوبات ممکن است در بافر شستشوی غلیظ ظاهر شوند.لطفاً بافر را گرم کنید تا تمام رسوبات حل شود که تأثیری روی نتایج نخواهد داشت.
• برای جلوگیری از خطای آزمایشی باید از پیپت دقیق استفاده شود.نمونه ها باید در کمتر از 5 دقیقه به میکروپلیت اضافه شوند.اگر تعداد زیادی نمونه گنجانده شود، پیپت چند کانالی توصیه می شود.
• منحنی استاندارد باید در هر سنجش گنجانده شود.چاه های تکراری توصیه می شود.اگر مقدار OD نمونه بیشتر از اولین چاه استاندارد است، لطفاً نمونه را (n بار) قبل از آزمایش رقیق کنید.هنگام محاسبه غلظت اصلی ترومبومودولین، لطفاً ضریب رقت کل (XnX5) را ضرب کنید.
• به منظور جلوگیری از آلودگی متقاطع، سیلرهای میکروپلیت فقط برای یک بار استفاده هستند.
• لطفا سوبسترا را از نور دور نگه دارید.
• تمام عملیات باید دقیقاً مطابق دستورالعمل سازنده باشد.نتایج توسط دستگاه Microtiter Plate Reader تعیین شد.
• تمام نمونه ها، بافر شستشو و ضایعات باید به عنوان عوامل عفونی در نظر گرفته شوند.
• معرف های لات های مختلف نباید مخلوط شوند.