کیت ضد HCV RUO Elisa

آزمایش ایمنی آنزیم برای تشخیص آنتی بادی ها علیه ویروس هپاتیت انسانی نوع C (HCV) RUO

ویروس هپاتیت C (HCV) ، که قبلاً به عنوان شکل منتقل شده از طریق پارنترا از هپاتیت غیر A و غیر B (NANBH) توصیف شده است¹، در 50 درصد موارد به یک بیماری مزمن تبدیل می شود.²HCV همچنین می تواند از طریق مصرف مواد مخدر و تماس خانوادگی منتقل شود.³ویروس هپاتیت C یک ویروس RNA تک رشته ای با برخی روابط ساختاری با خانواده فلاوی ویروس است.توالی اسید نوکلئیک از کلون های cDNA HCV پایه ای برای ساخت پپتیدهای ترکیب شده ای که پروتئین های ویروس هپاتیت C را نشان می دهند، فراهم کرد..^4,5غربالگری آنتی بادی ویروس هپاتیت C از خون با استفاده از پروتئین های مصنوعی یا ترکیب شدهبه شناسایی اهدا کنندگان خون ظاهرا سالم با آنتی بادی های ضد HCV کمک کرد که در غیر این صورت ممکن است ویروس را منتقل کنند.⁶

این یک آزمایش ایمونوسربنت مرتبط با آنزیم با استفاده از پروتئین های ترکیب شده حاصل از مناطق هسته ای ویروس HCV برای تشخیص وجود آنتی بادی های HCV در سرم انسان است.

مواد همراه با کیت:

روش ارزیابی

به شدت توصیه می شود که هر نمونه و کنترل در دو نسخه تجزیه و تحلیل شود.

1. 100 میلی لیتر ((یا 3 قطره) از مخلوط کننده نمونه را به چاه های آزمایش جداگانه توزیع کنید.
2. 100 میلی لیتر کنترل مثبت و کنترل منفی را به صورت دوگانه در چاه های جداگانه توزیع کنید.
3. 10 میلی لیتر از هر نمونه آزمایش را به چاه های آزمایش دوگانه اضافه کنید؛ گرداب برای مخلوط کردن.
4. برای 30 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد حبوب شود
5. هر چاه را 5 بار بشویید با پر کردن هر چاه با پاک کننده شستشو رقیق شده، سپس بشقاب را به شدت برعکس کنید تا تمام آب خارج شود و لبه چاه ها را روی کاغذ جذب کننده برای چند ثانیه مسدود کنید.
6. 100 میلی لیتر آنزیم کنژوگیت را به هر چاه اضافه کنید. آن را به آرامی مخلوط کنید با چرخش صفحه میکروتیتر بر روی بنک صاف برای 1 دقیقه.آنزیم کنژوگات را به چاه خالی اضافه نکنید.
7. برای 20 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد حبوب کنید
8. بشویید بشقاب 5 بار به عنوان مرحله 5.
9. یک قطره (50 میلی لیتر) از محلول سبسترات A (HRP-substrate) را به هر چاه اضافه کنید، سپس یک قطره (50 میلی لیتر) از محلول سبسترات B (TMB) را به هر چاه اضافه کنید. .
10. برای متوقف کردن واکنش رنگ، یک قطره (50 میلی لیتر) از محلول توقف را به هر چاه اضافه کنید.امکان خواندن مقدار OD در 450 نانومتر با یک خواننده صفحه فیلتر وجود دارد.. (با استفاده از ارزش OD چاه خالی برای اصلاح تمام OD خواندن از تمام چاه)