انسان ویتامین D ELISAکیت 

استفاده مورد نظر

کیت لیزا ویتامین D ما برای اندازه گیری سطح ویتامین D در سرم انسان، پلاسما، رسانه های کشت یا هر مایع بیولوژیکی است.

آماده سازی نمونه

1.سرمجبران خسارت

پس از جمع آوری کل خون، اجازه دهید خون لخته شود و آن را در دمای اتاق بدون مزاحمت رها کنید. این کار معمولاً 10-20 دقیقه طول می کشد. لخته را با سانتریفیوژ در 2000-3 حذف کنید.000 دور در دقیقه برای 20 دقیقهدر صورت ظاهر شدن رطوبت در طول ذخیره، نمونه باید دوباره سانتریفیوژ شود.

2.پلاسماpجبران خسارت

کل خون را به لوله هایی با ضد انعقادی (EDTA یا سیترات) جمع آوری کنید. پس از تزریق در دمای اتاق برای 10-20 دقیقه، لوله ها برای 20 دقیقه با 2000-3000 rpm سانتریفیوژ می شوند.با دقت از سطح بالا به عنوان نمونه پلاسمای جمع آوری کنید.در صورت ظاهر شدن رطوبت در طول ذخیره، نمونه باید دوباره سانتریفیوژ شود.

3.نمونه های ادرار

ادرار را در لوله های بی عمل جمع آوری کنید. پس از 20 دقیقه سانتریفیوژ کردن در 2000 تا 3000 دور در دقیقه، به دقت پس از جمع آوری سوپرناتنت آن را جمع آوری کنید. اگر در طول ذخیره سازی، رطوبت ظاهر شود،نمونه باید دوباره سانتریفیوژ شود.روش آماده سازی مایع مغزی و مایع پلوروپریتونیال مشابه نمونه ادرار است.

4.نمونه های سلولی

اگر می خواهید ترشحات سلول ها را تشخیص دهید، ماده فوق ترشح شده را در لوله های بی عمل جمع آوری کنید. پس از 20 دقیقه سانتریفیوژ کردن در 2000-3000 دور در دقیقه، ماده فوق ترشح شده را با دقت جمع آوری کنید.اگر شما می خواهید اجزای درون سلولی را تشخیص دهید، سلول ها را با PBS (pH 7.2-7.4) تا 1X100/ml رقیق کنید. سلول ها برای آزاد کردن اجزای درون سلولی با منجمد و ذوب مکرر نابود شدند.پس از سانتریفیوژ کردن به مدت 20 دقیقه در 2 دقیقه، سوپرناتان را با دقت جمع آوری کنید.در صورتی که در طول ذخیره سازی، رطوبت ظاهر شود، نمونه باید دوباره سانتریفیوژ شود.

5.نمونه های بافت

نمونه های بافت برش داده می شوند، وزن می شوند، در نیتروژن مایع منجمد می شوند و برای استفاده در آینده در -80 درجه سانتیگراد نگهداری می شوند. نمونه های بافت پس از اضافه کردن PBS (pH 7.4) همگن می شوند. نمونه ها باید در 4 درجه سانتیگراد کار کنند.پس از سانتریفیوژ کردن به مدت 20 دقیقه در 2 دقیقه، سوپرناتان را با دقت جمع آوری کنید.،000-3000 rpm. aliquot فوقانی برای آزمایش ELISA و استفاده آینده.

مواد ارائه شده با kاون

يادداشت:

• در هنگام دریافت کیت را در ۴ درجه سانتیگراد نگهداری کنید. کیت باید قبل از آزمایش به دمای اتاق تعادل یابد. هر نوار غیر ضروری را از صفحه پوشانده با آنتی بادی ویتامین D انسانی خارج کنید.آنها را در ورق زپ قفل کنید و در ۴ درجه سانتیگراد نگه دارید.
• ممکن است بارندگی ها در آب پاشی فشرده ظاهر شوند. لطفاً آب پاشی را گرم کنید تا تمام بارندگی ها از بین بروند، که بر نتایج تاثیر نخواهد گذاشت.
• برای جلوگیری از خطای تجربی باید از پیپیت دقیق استفاده شود. نمونه ها باید در کمتر از 5 دقیقه به میکروپلاکت اضافه شوند. اگر تعداد زیادی نمونه در نظر گرفته شود،پیپیت چند کانال توصیه می شود.
• منحنی استاندارد باید در هر آزمایش گنجانده شود. چاه های تکراری توصیه می شود. اگر مقدار OD نمونه بزرگتر از اولین چاه استاندارد باشد،لطفا قبل از آزمایش نمونه را (n بار) رقیق کنید.هنگام محاسبه غلظت اولیه ویتامین D، لطفاً فاکتور کل رقیق شدن (XnX5) را ضرب کنید.
• به منظور جلوگیری از آلودگی متقابل، مهر و موم های میکروپلاکت تنها برای استفاده یکبار مصرف می شوند.
• لطفاً سوبسترات رو از نور دور نگه داريد
• تمام عملیات باید مطابق با دستورالعمل های سازنده دقیق باشد.
• تمام نمونه ها، آب پاش و زباله ها باید به عنوان عوامل عفونی مورد استفاده قرار گیرند.
• واکنش ها از دسته های مختلف نباید مخلوط شوند.