ویتامین B12کیت تست ELISA
نام داروها
نام عمومی:VB12 کیت ELISA
هدف
این کیت امکان تعیین غلظت VB12 در نمونه را فراهم می کند.
اصول آزمایش
این کیت از رقابت ELISA برای اندازه گیری سطح VD در نمونه استفاده می کند،از آنتی بادی پاک شده VD استفاده می کند.
برای پوشش چاه های صفحه ی میکروتیتر، آنتی بادی فاز جامد را ایجاد کنید، VD و آنتی بادی را اضافه کنید که با HRP
برچسب VD به چاه های پوشش داده شده میکروتیتر، باعث می شود آنها را ترکیب رقابتی، پس از شستن
به طور کامل، اضافه کردن TMB محلول بستر. عمق رنگ و VD نمونه بودند
با همبستگی مثبت، تراکم نوری (OD) را در ۴۵۰ نانومتر با خواننده صفحه میکروتیتر اندازه گیری کنید،
غلظت VD را با منحنی استاندارد محاسبه کنید.
| جزئیات محصول |
توضیحات |
| تحویل |
در عرض 48 ساعت |
| مشخصات بسته بندی |
8 × 12 نوار، 96 چاه |
| کشور منشاء |
چین |
| تولید کننده |
18 ماه |
| روش نگهداری |
2°C تا 8°C |
| نمونه |
خون کامل |
| آشامیدن |
کلاس1 |
| نوع |
کیت تست الیزای |
اصل آزمایش
مواد همراه با کیت
| 1 |
محلول شستشو |
20ml × 1 بطری |
8
|
1 استاندارد ((48nmol/L) |
0.5ml×1 بطری |
| 2 |
واکنشگر HRP-Conjugate |
بطری 6 میلی لیتر × 1 بطری |
2 استاندارد ((24nmol/L)) |
0.5ml×1 بطری |
| 3 |
استریپلایت مایکروالیسا |
12 خوب × 8 نوار |
3 استاندارد ((12nmol/L) |
0.5ml×1 بطری |
| 4 |
راه حل متوقف کنید |
بطری 6 میلی لیتر × 1 بطری |
4 استاندارد ((6nmol/L) |
0.5ml×1 بطری |
| 5 |
محلول کروموجن A |
بطری 6 میلی لیتر × 1 بطری |
5 استاندارد ((3nmol/L) |
0.5ml×1 بطری |
| 6 |
محلول کروموجن B |
بطری 6 میلی لیتر × 1 بطری |
9 |
راهنمای کاربری |
1 |
| 7 |
مخلوط کننده نمونه |
بطری 6 میلی لیتر × 1 بطری |
10 |
غشای صفحه بسته |
2 |
روش ارزیابی
1. نمونه اضافه کنید:چاه های خالی را به طور جداگانه تنظیم کنید (چشمه های مقایسه خالی نمونه و نمونه را اضافه نمی کنند)
واکنشگر ELISA، دیگر هر مرحله عمل یکسان است.
40μl را به نمونه آزمایش که بر روی بشقاب های ELISA پوشانده شده است رقیق کنید، سپس نمونه آزمایش را اضافه کنید.
10μl (درجه رقیق شدن نهایی نمونه 5 برابر است) ، نمونه را به پایین صفحه های ELISA اضافه کنید.
به خوبی پوشش داده شده، تا جایی که ممکن است به دیوار چاه دست نزنید و به آرامی مخلوط کنید.
2. افزون بر آنزيما:به هر چاه، به جز چاه خالی، 50μl از واکنشگرهای ELISA اضافه شود.
3بعد از بسته شدن صفحه با غشای صفحه بسته شدن، برای 30 دقیقه در 37 °C انکوب کنید.°C.
4مایع را تنظیم کنید: 30 بار از Wash Concentrate 30 بار با آب تقطیر شده و
نگهدار.
5. شستن:پرده پرده صفحه بسته شدن، دور ریخته مایع، خشک با تکان دادن، اضافه کردن شستن
به هر چاه بفرستيد، براي 30 ثانيه خاموش باشيد بعد برش داريد، 5 بار تکرار کنيد، با ضربه خشک کنيد.
6. رنگ:به هر چاه، رژکتور رنگی A 50μl و رژکتور رنگی B 50μl اضافه کنید. به آرامی مخلوط کنید و آن را به صورت کوبنده قرار دهید.
براي 10 دقيقه در 37°C.
7واکنش رو متوقف کن:به هر چاه 50μl محلول توقف اضافه کنید، واکنش را متوقف کنید ((رنگ آبی
به رنگ زرد تغییر می کند بلافاصله).
8. آزمایش:خروجی خالی را به صفر برسانید، چگالی نوری (OD) را در ۴۵۰ نانومتر بعد از اضافه کردن
راه حل را متوقف کنید و در عرض 15 دقیقه
محاسبه کن
از تراکم استاندارد به عنوان افقی، ارزش OD برای عمودی استفاده کنید،
منحنی استاندارد بر روی کاغذ گراف، چگالی مربوطه را بر اساس نمونه پیدا کنید
مقدار OD با منحنی نمونه، ضرب بر چند برابر رقیق شدن، یا محاسبه خط مستقیممعادله رگرسیون منحنی استاندارد با تراکم استاندارد و مقدار OD، با
مقدار OD نمونه در معادله، تراکم نمونه را محاسبه می کند، ضرب بر رقیق کردن
چندگانه، نتیجه چگالی واقعی نمونه است.
یادداشت های مهم
- کیت از محیط خنک کننده خارج می شود باید 15 تا 30 دقیقه در دمای اتاق تعادل داشته و سپس استفاده شود، صفحه های ELISA اگر بعد از باز شدن استفاده نشده باشد،صفحه باید در کیسه ای مهر و موم شده نگهداری شود..
- پاک کننده شستشوی جداسازی کریستالیزه خواهد شد، آن را می توان گرم آب کمک می کند به حل زمانی که
شستشويي بر نتيجه تاثيري نداره.
- نمونه را با نمونه گیر اضافه کنید هر مرحله، و دقت آن را به طور مکرر بررسی کنید، از خطای تجربی اجتناب کنید. نمونه را در عرض 5 دقیقه اضافه کنید، اگر تعداد نمونه ها زیاد باشد، توصیه می شود از Volley استفاده کنید.
- لطفاً زمانی که تست می کنید، منحنی مشخصات را بسازید، بهتر است به خوبی تکرار کنید،اگر در نمونه محتوای مواد مورد آزمایش بیش از حد بالا باشد (OD نمونه بزرگتر از OD اولین چاه استاندارد است)لطفاً از رقیق کردن نمونه برای رقیق کردن چند برابر مشخص (n بار) استفاده کنید، سپس آزمایش کنید. لطفاً زمان رقیق شدن کل را هنگام محاسبه ضرب کنید ((×n×5).
- غشای صفحه بسته فقط استفاده یکبار مصرف را محدود می کند تا از آلودگی همپوشانی جلوگیری شود.
- بستر لطفا از حفاظت از نور فرار کنید.
- لطفاً طبق دستورالعمل استفاده دقیق، برای تعیین نتایج آزمایش باید از خواننده صفحه ی میکروتیتر به عنوان استاندارد استفاده کنید.
- تمام نمونه ها، آب پاش و هر نوع مواد دفع شده باید مطابق با فرآیند مواد عفونی باشد.
- این واکنشگر که جزء مختلف شماره دسته را مخلوط نمی کند.
- اگر این روش آموزش انگلیسی متفاوت باشد، آموزش انگلیسی را به عنوان استاندارد انتخاب کنید.
ذخیره سازی و ثبات
• در ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.
• واکنشگرهای استفاده نشده را به 2- 8 درجه سانتیگراد مهر بزنید و برگردانید، در این شرایط ثبات برای 2 ماه یا تا تاریخ انقضا برچسب شده حفظ می شود، هر کدام زودتر باشد.
پیام شما باید بین 20 تا 3000 کاراکتر باشد!
